Elf-1和VEGF在非小细胞肺癌中的表达及意义.doc

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1、E1M和VEGF在非小细胞肺癌中的表达及意义[摘要]背景与目的:血管内皮细胞生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)促进肿瘤血管生成的作用与Ets家族有关,Ets家族中对Elf・l的研究较少。本研究检测菲小细胞肺癌(nornsmallcelllungcancer,NSCLC)组织屮转录因子EIf-1和VEGF的表达,探讨其与NSCLC临床病理特征的关系。方法:应用组织芯片仪制备含69例NSCLC组织和6例正常肺组织的组织芯片,Elf-1的及VEGF的蛋白表达水平的检测是采用免疫组织化学方法(PowerVision™.9000法)。结果:E1M

2、和VEGF在正常肺组织中的表达均为阴性,在NSCLC组织中表达的阳性率分别为72.46%和63.77%,肿瘤分化的程度、肿瘤临床分期及其淋巴结转移和术后生存期均和二者的表达水平有关(P均<0.0l)oKaplan-Meier生存分析表明二者的过表达均与患者的生存率有关,阳性表达的患者生存率明显低于阴性者(PvO.Ol,P<0.01)o在NSCLC中,Elf-1的表达与VEGF的表达呈正相关(r=0.702,P<0.01)o结论:E1M和VEGF在NSCLC组织中的过表达与肿瘤的分化、淋巴结转移和病人预后均有关,判定NSCLC恶性生物学行为可以采用联合检测Elf-1和VEGF的蛋白水平来

3、做参考指标。关键词:Elf-1;VEGF;非小细胞肺癌中图分类号:R734.2文献标识码:A文章编号:1000-467X近年大量研究表明,肿瘤灶血管生成的加速会促进恶性肿瘤的发生发展过程,加快其生长,转移2】。VEGF是迄今为止发现的最主要的促血管生长因子。近年研究发现其这种作用与Ets家族有密切关系W冃前,对Ets家族中的Ets・l和Ets・2研究较多冋,对Elf・1的研究较少。而Elf・1在血管生成屮的作用往往较Ets・l和Ets・2更为重要〔他。迄今为止国内尚未见NSCLC组织中Elf・l的表达与VEGF的表达是否有相关性的研究报道。我们采用组织芯片及免疫组织化学的方法(Powe

4、rVision™・9000法)来检测Elf・l和VEGF在NSCLC中的表达,并进一步分析二者的相关性,探讨Elf・1在NSCLC血管生成中的作用。为临床判定NSCLC生物学行为提供理论依据。1材料和方法1.1材料材料来源于滨州医学院附属医院,随机收集了2001年3月到2003年3月的非小细胞肺癌标本69例(术前未行放、化疗),这些标本均为手术切除,经过病理检查证实诊断。这些标本和6例正常肺组织标本常规HE染色。其中男性44例,女性25例;年龄36・73岁,中位年龄54.5岁;36例鳞癌标本:其中11例I级、18例II级、7例III级。33例腺癌标本:其中8例I级、19例II级、6例H

5、I级。肿瘤按照大小分为三组,分别为为D<3cm(24例);3cm5cm(27例);按照年龄大小分为二组,YS55岁(31例)、Y>55岁(38例)二组。按照病例德淋巴结转移情况记录分有转移的病例32例。肿瘤的分期标准按照1997年UICC肺癌分期标准实行,其中T]N()Mo者12例,T

6、N

7、Mo者9例,TlN2M0者3例,T2NoMo者12例,T2N

8、Mo者5例,T2N2M0者1例,T3NoMo者13例,T3N

9、M0者3例,T3N

10、M

11、者3例,T3N2Mo者1例,T3N2MI者1例,T3N3M1者2例,T4N

12、M0者1例,T4NiMi者1例,T4N2M0者1

13、例,T4N2M]者1例。吋间截止到2008年9月,所有标本随诊了5年以上,其中25例患者年内死亡(表示为XS1年组,21例患者随诊五年生存(表示为X25年组)。1.2主耍试剂Elf・l和VEGF抗体(均为兔抗人)來自美国SantaCruz公司;由北京中山生物技术有限公司购得PowerVision™-9000试剂盒。1.3实验方法组织芯片的制作方法是采用组织芯片制作机,直径2mm的细针打孔。PowerVision™-9000法按照试剂盒的使用说明进行。1.4结果判断141VEGF:随机选择除外坏死区的高倍视野5个,总共计数1000个肺癌细胞,来计算阳性细胞所占白分比,分为四级:0为无阳性

14、细胞,1为阳性细胞<25%,2为阳性细胞数占26%・5()%,3为阳性细胞>5()%。染色强度也分为四级:无阳性细胞表示为0,弱阳性表示为1,阳性表示为2,强阳性表示为3。VEGF的评分等级以染色强度和阳性细胞所占白分数Z和来表示:其和最大为6,以二者和大于2即判定免疫组织化学阳性。具体来说分为三级:阴性为二者Z和0・2分,低级为二者Z和34分,高级为二者之和5・6分[⑼。1.4.2Elf-1:随机选择除外坏死区外的的高倍视野10个(1()0个

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