X发酵工程工艺原理复习思考题答案.doc

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1、《发酵工程工艺原理》复习思考题第一章思考题:1.何谓次级代谢产物?次级代谢产物主要有哪些种类?次级代谢产物:由微生物新陈代谢所产生的、对一•般生命活动并不必需的代谢产物。糖苛类、多肽类、酰基类、核昔类及混杂类。2.典型的发酵过程由哪几个部分组成?原始材料:菌株;培养基的碳源、氮源、微量元索以及生长因子;上游过程:对菌种加以改造,提高生产能力或者导入外源基因等以获得工程菌;发酵过程:发酵或生物转化,是通过优化发酵条件如温度、营养、供气量等。利用工程菌的生物合成,加工和修饰等以获得FI的产物;下游过程:是运用生物化学、物理学方法分离、纯化产品,最终

2、将产品推向市场并获得社会或经济效益。3•发酵工程的特点及微生物的共性.发酵过程的特点:■发酵过程以生物体的自动调节方式进行,数十个反应过程能够象单一反应一样,在发酵设备屮一次完成。■反应通常在常温常压下进行,条件温和、能耗少,设备较简单。原料以农副产殆、再生资源(植物秸杆、木屑)为主。•可生产复杂的化合物。■发酵过程需防止杂菌污染(设备灭菌、空气过滤)。■除利用微生物外,还可以用动植物细胞和酶,也可以用人工构建的遗传工程菌进行反应。■投资少、见效快、利润丰厚。是生物工程制品的最后表达形式。微生物的共性:(1)对周围环境的温度、圧强、渗透圧、酸碱

3、度等条件有极人的适应能力。(2)有极强的消化能力。(3)有极强的繁殖能力。第二章思考题:1.发酵对微生物菌种有何要求?举例说明。1.能在廉价原料制成的培养基上迅速生长,并能高产和稳产所需的代谢产物。2.可在易于控制的培养条件下迅速生长和发酵,且所需的酶活性高。3.生长速度和反应速度快,发酵周期短。4.副产物尽量少,便于提纯,以保证产詁纯度。5.菌种不易变异退化,以保证发酵生产和产品质量的稳定性。6.对于用作食品添加剂的发酵产品以及进行食品发酵,其生产所用菌种必须符合食品卫生要求。2.什么叫自然突变和诱发突变?诱变育种的实质是什么?自然突变:环境

4、因素的影响,DNA复制过程的偶然错误等而导致,-般频率较低,通常为10-6-10-9o诱发突变:某些物理、化学因索对生物体的DNA进行直接作用,突变以较高的频率产生。诱变育种原理:点突变:碱基对置换和移码突变染色体畸变:在染色体上发生大的变化,如断裂、重复、缺失、易位和染色体数H变化等结构变化。3.何为转化、转导、DNA体外重纽技术?举例说明在发酵工业屮的应用。转化(transformation):(游离DNA分子+感受态细胞)从供体(提供DNA的细胞)细胞小取出遗传物质,通过对受体(获得DNA的细胞)细胞的培养处理,使供体的DNA片段进入受体

5、细胞内,与受体细胞的DNA重新组合而获得变种的一种育种方法。转导(transduction):(由噬菌体介导)由噬菌体作媒介,将一个细胞的遗传物质传递给另一个细胞,从血获得高产变种的一种育种方法。DNA体夕卜重组技术(invitrorecombinationDNAtechnology)根据需要用人工方法取得供体DNA上的基因,在体外重组于载体DNA上,再转移入受体细胞,使其复制、转录和翻译,表达出供体原有的遗传性状。1.何为营养缺陷型?举例说明营养缺陷型的筛选方法。菅养缺陷型(auxotroph):一种缺乏合成其生存所必须的营养物(包括氨基酸、

6、维生索、碱基等)的突变型,貝有从周围环境或培养基屮获得这些营养或其前体物(precursor)才能生长。常用X-表示。营养缺陷型的筛选(青霉素法)离心洗涤二次.愜菌培养诱变处理C・M・或S・中间培养7生长谱渭定0€洗冷后无寓M.M堵和1~2小时索500微克/*升培养停止“HE2008年9”缺陷型血棵发酵工程工艺桑倉962.如何筛选抗性突变株?抗牛索抗性突变:将菌种诱变处理,用含有某种药物的培养基挑选抗性突变体,野生的敏感菌不能在这种培养基上生长。用梯度平板法。抗噬菌体菌株选育:诱变后用高浓度噬菌体平板筛选抗性菌株。条件抗性突变:温度每攵感突变。

7、3.菌种保藏FI的与核心是什么?产泡子的微生物适宜用何种保藏方法?Fl的:保证菌种不发生遗传变异、无污染和保持活力。核心:人工创造条件(如低温、干燥、缺氧、和缺乏营养物质),使菌种的代谢活动处于不活动状态。1.酵母菌:一般采用定期移植斜面低温保藏法,将酵母接种于麦芽汁琼脂斜面上,放置低温处,每隔几个月移植一次。也可采用石蜡油封藏法。1.霉菌:采用砂土管保藏法。此法特别适宜于产泡子或芽泡的微生物。2.细菌和放线菌:一般细菌采用冻干法为住,放线菌可采用冻干法和砂土管法保藏。1.造成菌种退化的原因是什么?生产屮如何防止菌种的退化?菌种退化的原因:保藏

8、方法不妥、保藏操作不当、传代不当、培养基不适、回复突变。防止菌种退化的措施从菌种选育方法上考虑1)进行充分的后培养及分离纯化2)增加突变位点,减少基因

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