[精品]驱蚊草组织培养论文.doc

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1、驱蚊草叶片诱导生芽的研究许章磊武昌理工学院生命科学学院，武汉（430000）摘要：本文以驱蚊草的幼嫩叶片作为外植体，经酒精、升汞消毒后分别接种到不同培养基上进行丛生芽的诱导，从而探寻出较优的消毒及诱导生芽方案。试验结果表明：外植体用75%的酒精消毒10s效果最佳；最有利于叶片诱导生芽的培养基为1/2MS+BA1.0+NAA1.0,生芽率高达100%。生芽周期为20天左右。关键词：驱蚊草，组织培养，生芽1引言驱蚊草（Mozziebuster）,乂名净蚊草，是荷兰遗传学家迪克经过多年潜心研究而得，他是非洲天竺葵和屮国香茅草的

2、细胞融合产物。香茅草含有多种精油，生要有香茅醛，还有香茅醇、金合欢醉和二戊烯等。天竺葵能通过叶片释放人量气体，驱蚊草结合了二者的特点，可以通过叶片散发一种驱蚊物质——香茅醛。香茅醛是一种常用的香料，柠檬香气，具有良好的驱蚊效果，对人体无害。经科学测定，一盆冠幅直径为20^30cm的驱蚊草的有效驱蚊面积达15cm2左右。驱蚊草对以正常开花，但宙于是融合体，所以种了高度不育。常规打插繁殖方法繁殖系数低，成苗慢，不能满足市场需求。采用组织培养法可在短期内繁殖大量的成苗。该试验探讨驱蚊草叶片诱导生芽的方案为市场人规模组培生产驱蚊

3、草提供了一些技术依据。2材料与方法2.1材料驱蚊香草：材料取自武汉花卉市场，为商品驱蚊草，当年生，生长健硕、无病虫害。夕卜植体为该植株初生的幼嫩叶片。2.2培养条件培养期间温度为（25+1）0C,光照强度为2000Lx,光照每天13h。2.3试验方法2.3.1外植体的灭菌取驱蚊草下端较嫩的叶片，先用流水冲洗2h,然后用75%的酒粘分别漂洗10s、20s、30s,无菌水洗2〜3次,再用0.1%的升汞消毒6.5min,用无菌水冲洗3〜5次。分别接种到3%蔗糖+MS+BA1.0+NAA1.0的培养基屮进行培养。7天后观察外植体

4、污染情况。2.3.2不定芽的诱导以MS、1/2MS培养基为慕本培养基，分别附加不同浓度的6-BA、NAA作为诱导培养基（见表1）。以上培养基均含蔗糖3%、琼脂0.75%。定期观察外植体诱导情况。按该公式计算生芽率：生芽率（％）=生成芽的外植体总数（块）/接种外植体总数（块）X100表1培养基的配方序号MSNAA6-BA1MS0.51.02MS1.01.03MS2.01.041/2MS0.51.051/2MS1.01.061/2MS2.01.03结果与分析3.1酒精消毒时间对外植体灭菌效果的影响植物组培中，对外植体的消毒是

5、十分重要的一个环节，消毒时间过长会对外植体纽织有损伤，消毒时间过短，会是灭菌不彻底而导致培养污染，实验失败。经查阅相关文献得知常规驱蚊草外植体消毒为升汞和酒粘共同消毒。0.1%的升汞消毒6.5分钟效果得到了很多实验的认可,但酒精消毒时间却有所区别。从实验结果表2可以看出,当75%的酒精消毒时间为10S的时候，対外植体的消毒是最好的。表27天后不同酒精消毒时间对外植体灭菌效果的影响序号75%酒梢消毒时间生长悄况污染率15s叶子周围有白色菌落98%210s叶子卷曲，无污染5%20s叶子卷曲，变黄，褐化2%注：每个序号均有三瓶

6、做同等对照。序号1的培养基本中几乎全部都有感菌的迹象，有几个只是暂时细菌没有涨起来。序号3的培养基中将近所有的外植体均有变黄褐化死亡的趋势。序号2的培养基中外植体生长状况很正常。3.2MS浓度对外植体生长的影响用不同浓度的MS培养基可以对外植体的矿物质以及离了浓度进行控制，从血对外植体的生长进行调控。由表3知：在相同激索的条件下，MS的浓度对外植体的生长影响很人，表现为浓度高反而不利于外植体的生长和诱导，而且有容易产生褐化；低浓度的对外植体的诱导比较有利。故对于外植体的生长，1/2MS培养基比MS培养基更优。表3MS浓度

7、、激素配比对外植体生长及芽诱导的影响序号MSNM6-BA时间生长情况出芽率7d叶子卷曲，边缘褐化1MS0.51.0lOd佝舉绿色愈伤组织形成，人部分外植休变譽5%20(1有极少数长出翠绿色小芽，大部分褐化死了7d叶子卷曲，边缘褐化2MS1.01.0lOd右•墨绿色愈伤组织形成，人部分外植休变黑25%20d有少数长出翠绿色小芽，大部分褐化死了7d叶子卷曲，边缘褐化3MS2.01.0lOd右•舉绿色愈伤组织形成，部分外植体变奧10%20d有少数长出翠绿色小芽，大部分褐化死了7d叶子卷曲,边缘褐化41/2MS0.51.0lOd

8、右典绿色愈伤组织形成，部分外植体变黑50%20d长出翠绿色小芽7d叶子卷曲，边缘褐化51/2MS1.01.0lOd有墨绿色愈伤组织形成，外植体变黑1()0%20d全部长出翠绿色小芽7d叶子卷曲,边缘褐化61/2MS2.01.0lOd有矍绿色愈伤组织形成，部分外植体变黑75%20d长出翠绿色小芽，小部分依然是愈伤3.3