肿瘤模型专题.doc

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1、肿瘤模型专题1.最新的药效学指导原则要求化药临床前进行至少5种人源肿瘤的体内抗癌活性评价，以确定药效及抗瘤谱。2.瘤株对药物的敏感性通过体外筛选可以说明，而体内评价更大程度上是考虑药物经体内吸收、分布、代谢之后的活性，由于目前的肿瘤模型多采用皮下接种，并不能完全反映药物的组织分布对其影响，所以感觉这种要求就显得不是很必要。注解：体内的敏感性不是仅考虑吸收分布代谢的影响，一些样品，体外活性都是不错的，体内甚至是瘤内直接注射给到很高剂量都没有效果，肿瘤细胞在体内和体外的生存环境差别很大，体外模拟的生存环境完全不能体现出体内的状态。3.皮下接种是一个目前能找到的最好的权宜之计了，实际上，SFDA明

2、确表示，鼓励原位肿瘤模型，但是由于技术的原因，很多瘤株都无法实现。而皮下模型有它的一系列优点：稳定，便于观察，易于构建，易于控制等等，能够在一定程度上反映药物经过体内过程的疗效，所以目前只能用它来进行评价。4.实际上原位肿瘤模型仍然不能很好的反映临床肿瘤的特点，目前能够预见得到最好的模型应该是经过基因修饰（转基因等）的能够集中比较均匀的自发模型，这才是和临床最接近的肿瘤模型。但是目前的经过基因修饰的自发肿瘤模型种类很少，而且可控制性差，周期长，所以还要经过很长时间的改善才能大规模的应用。1.常规的肿瘤细胞株接种后如果不能成瘤，细胞悬液就会被动物吸收2.瘤体积可用游标卡尺量最长径（a)和最短径

3、（b），体积计算公式：V=πab^2/6,每2-3天测一次。体积=宽^2*长/2的公式计算肿瘤体积；抑瘤率=（对照组-治疗组）/对照组*100%；；tumorsize=width2·length·0.52).；Πab2/6；关于肿瘤体积的计算：3.1415926....../6约等于/2。如果想做得讲究一点，应该用RTV计算肿瘤体积：RTV（某日某老鼠的相对肿瘤体积）=TV(测量当天该老鼠的肿瘤体积）/TV（分组当天该老鼠的肿瘤体积）*100，在此基础上进行平均值SD等数据的计算3.是否必须称重小鼠的胸腺和脾脏4.超过7天的腹水再传代就很容易出现血性；动物的周龄也不要太大，6周左右。传代次数

4、太多也很容易出现血性腹水。血性腹水可以离心后加0.17N的NH4CL溶液破红细胞，然后精确一些的控制条件（接种量，传代时间，动物周龄等）传几代，很多情况下再传一两代后会有不血性的种鼠出现，然后用这只种鼠的腹水继续传代5.皮下接种与剥瘤子：小鼠肿瘤剥瘤子是一个艰难的过程，但是可以一定程度上的改善一下：接种的时候要精确控制接种在皮下，靠皮内会与皮肤强烈粘连，靠肌肉会与肌肉强烈粘连，而且不要太靠腋窝里面，可以往尾部靠一些，也可以稍微的往背部靠一点，不要往腹部靠，容易使肿瘤被垫料磨烂。1.LD50是毒理中的半数致死量，ED50是体外试验中的半数有效量，一般体内实验没有类似的指标，如果想比较几个类似物

5、的药效还是做量效曲线比较好。2.剂量设置应该按照LD10(10%致死剂量，也叫最大耐受剂量）来分组，一般分别采用1/2LD10,1/4LD10,1/7LD10或1/10LD,但最大剂量不得超过LD10。这里面还得考虑ED50，LD10与ED50的剂量相差越大越好。用LD50作为标准设置剂量是不现实的，因为动物实验是不可能允许10%以上动物死亡的。3.说到疗效的比较，如只是发文章，比较不同基团之间可能对母体抑瘤率的影响，一般做做体外试验，比一比大家的IC50就好了，不太做体内。如是真正的筛药，我个人有些观点：这个不是孤立起来看某个或者某几个剂量下谁比谁的抑瘤率高。主要要看谁更具有可开发性。首先

6、，要考虑它的毒性以及治疗窗口的大小，通俗的说，就是这个要在发挥疗效的剂量下，毒性是否大？比如A药，10mg抑瘤率有50%，但是体重下降了20%;而B药，10mg的时候根本无效，30mg的时候有40%的抑瘤率，60mg的时候抑瘤率高达80%，而且体重几乎没有下降，这个时候A药与B药如何比较？特别如果是公司筛选新药，还要考虑成本，病人可接受度（动物上的有效剂量换算到人一天要吃2斤，这种药也是不现实的），制剂，工艺等等方面。如果单纯从药理的角度给出答案，至少要考虑毒性和剂量限制的问题。1.关于剂量选择，LD50的几分之一是一种比较通用的方法，目前相对更合理一些的剂量选择是做一个简单的多次给药的毒理

7、试验来确定剂量，我们一般会连续给药一周，然后再观察一周，这样摸出来的最大剂量可以直接用于药效试验，然后其他的剂量都在此剂量的基础上往下减。2.说到给药疗程，一般初筛的药物都是连续天天给药，qd。但是给药途径，特别是i.v与i.p的选择，我们都是先做一个简单的PK试验考察一下，再确定，特别是如果PK试验的结果显示，血药浓度甚至达不到体外IC50的浓度，那么是否进行体内试验，就有待商榷了。连续i.p，小鼠的皮肤有