维生素E含量测定方法.doc

《维生素E含量测定方法.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、高效液相色谱法对维生素E粉、E油含量的测定色谱条件色谱柱：采用C18柱(长150mm，内径4.6mm，粒径4-5μm)流动相：甲醇(色谱醇)+水(去离子水)比例：(98+2)流速：1.2ml/min检测波长:285nm柱温:25±2℃进样量：20μL溶液制备标准溶液的制备：本实验室的标准品为液体油状物，因此用注射器抽取直接滴加到容量瓶中称量，把容量瓶放在分析天平托盘上然后滴加，称取维生素E标准品约0.1g(准确至0.0002),置50mL棕色量瓶中,加甲醇适量溶解并稀释至刻度,摇匀。绘制标准曲线把制成2.008mg/mL的溶液作为贮备液。分别准确移取0.5、1.25、2.

2、5、3.75、5mL至10mL的棕色量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀；得到浓度分别为0.1004、0.251、0.502、0.753、1.004mg/ml的五种溶液，分别经0.45μm滤膜滤过,滤液作为标准溶液。用100μL的进样针分别从制备的不同浓度的标准溶液抽取60μL溶液，注意不能带有气泡，注入液相色谱仪,按色谱条件操作,从0.1004——1.004mg/ml依次进样，记色谱峰面积以标准品溶液浓度(C)为纵坐标,峰面积(A)为横坐标,按照外标法过5点绘制标准曲线。样品溶液的制备：维生素E粉样品溶液的制备制备步骤为：研磨→称量→水浴溶解→定容→过滤1.研磨把试样E粉倒入

3、研钵中适量，用研磨棒轻度研磨至颜色有变化为止。2.称量把称量纸放到分析天平上然后置零，把研磨好的试样用药匙转移到称量纸上，称取维生素E粉约1g(约相当于维生素E0.5g，准确至0.0002g),置50mL棕色量瓶中。3.水浴溶解加甲醇适量,置超声波水浴器中助溶20min。4.移取定容冷却至室温,用甲醇稀释至刻度,充分摇匀，从制备好的溶液中移取1mL到10mL的容量瓶中，用甲醇稀释至刻度,充分摇匀;再从制备好的10mL容量瓶中的溶液中移取2.5mL放置到10mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度,充分摇匀。5.过滤把制备好的溶液经0.45μm滤膜滤过,滤液作为样品溶液。维生素E油样

4、品溶液的制备用注射器直接抽取E油样品滴加到放在分析天平上的容量瓶中，称维生素E油样品约20mg,(准确至0.0002),置50mL棕色容量瓶中,加甲醇适量溶解，置超声波水浴中助溶10min,冷却至室温,用甲醇稀释至刻度,充分摇匀；经0.45μm滤膜滤过,滤液作为样品溶液。测定步骤用100L的进样针抽取60μL的维生素E粉、E油的样品溶液,注入液相色谱仪，按色谱条件操作,得到色谱峰面积(Ai)，每批次样品溶液做三个平行样，根据标准曲线上各点的峰面积(Ast)，用外标法计算。计算和结果的描述计算公式维生素E的含量X2以质量分数(%)表示X2=×100%式中：X2——样品中维生

5、素E的含量﹙%﹚mst——标准品的质量﹙g﹚mi——样品的质量﹙g﹚Pst——维生素E标准品的含量﹙%﹚Ai——样品溶液中维生素E的峰面积Ast——标准溶液中维生素E的峰面积