怎样做葡萄酒苹果酸测定.doc

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1、怎样做葡萄酒苹果酸测定一，原理：龟兔赛跑的故事大家都听说过，纸层析苹果酸测定就是葡萄酒中酸的“龟兔赛跑”。想把一大群龟兔分开，最好的办法就是举行赛跑比赛。枪响！大群兔子跑开了，龟都落在了起点附近。假如加入一群犬，犬比兔子还快，会跑得更远。层析中，葡萄酒中的酒石酸就是龟，苹果酸就是兔子，乳酸琥珀酸就是犬。犬比兔子跑得快，但也快不多，要想分的开一点，就要延长比赛时间和距离。层析也一样，纸长一点（30厘米左右），展开时间也长一点（4-6小时），酸才能分得开。层析过程好似赛跑过程。比喻是为了理解，并不一定精准。二，材料准备；1，高30公分的

2、层析缸；（见图）如果没有现成的，自制可用5毫米厚的玻璃，裁成31厘米长、13厘米宽的4块做成方形筒体，14厘米*14厘米大的一块做底板。用玻璃胶粘结。再在口部粘两块可以挂层析纸的凹槽板就可以了。（见下图）2，展开剂；买正丁醇一瓶（500毫升，参考价15元），冰乙酸一瓶（500毫升，参考价18元），溴酚蓝一瓶（25克参考价29元）和苹果酸一瓶（100克参考价15元）。按溴酚蓝0.1克、正丁醇100毫升、乙酸50毫升配好溶液备用。3，苹果酸标准液按蒸馏水100毫升，苹果酸0.5克配方备用。4，滤纸：买60厘米*60厘米的普通滤纸（参考价

3、1-2元一张），裁成30厘米长，宽度按瓶的口径或实际需要剪裁。这种未经酸化的普通滤纸斑点拖尾会比较长，会影响图的质量。见下图：未经酸化的滤纸苹果酸斑点长达10厘米经过酸化后，斑点缩减至4厘米滤纸买来后，可以先用苹果酸试一下展开，如果展开剂里展开5.5小时，其斑点长度在6厘米左右，则不必进行酸化处理，因为酸化比较麻烦，特别是丙酮受控制不太好买。有时碰巧买到质量比较好的滤纸就可以省却酸化这一步。上图可以看出，2010年购入的滤纸质量较好，虽然其苹果酸斑点较长，但也可以使用。正丁醇和冰乙酸一般化工商店有售，容易买到。滤纸、溴酚蓝淘宝网上有

4、售，键入“600*600滤纸”“DL苹果酸”和“溴酚蓝”就找到了。滤纸的酸化很麻烦。滤纸酸化中三，滤纸上划定点位：先要计划一下设几个点，比如苹果酸要设一个点，正在进行苹乳的酒肯定要一个点，作为对照比较，未经苹乳过的也设一个点，如此需设3个或者4个点。确定点位数后，即可在纸上画点。先在离滤纸的底部约3厘米处（2-4厘米都可）轻轻的画一条平行线，间隔2-3厘米做点。一张9-10厘米宽的滤纸最多可点4个点（开始学习时最好不超过3个点）。如图：四，点样：1，溶液标记和放置：将苹果酸和所需测定的葡萄酒溶液分别置于可乐瓶盖子内，容量最好为三分之

5、一到四分之一瓶盖（样点的大小与盖中的溶液多少关系极大），少了不方便，多了怕点液量太大，按次序放好并作出标记，同时在滤纸的顶端也做相应标记，以免展开后弄不清楚和便于日后查验。如图：2，点样点：用牙签作点样点工具，样点直径以5毫米左右为宜。反复点30次以上，大约工作30分钟就可以放入层析缸“展开”了。五，展开：将已经配好的展开剂150毫升倒入层析缸中，将滤纸用双面胶粘在竹片上（用回形针方便但易生锈），然后挂在层析缸瓶口的凹槽板上，底部（点有样点的一端）浸入溶液1厘米即可。用保鲜膜封住瓶口，再用橡筋箍住密封（展开剂挥发性很强必须密封）。如

6、图：展开剂在滤纸上的爬行速度（供参考）第一小时可爬高约11厘米，第二小时可爬高到约16厘米，第三小时可爬高到约19厘米，以后越爬越慢，六小时达25厘米左右（滤纸、气温等条件不同，速度有差异）。附：苹果酸在同一张滤纸上不同展开时间的显示情况：六，风干；五至六小时后可取出挂起，自然风干。七，判读：风干后的滤纸底色为紫蓝色，酸是以黄色来表现的。黄色的斑块颜色越深，范围越大，酸的含量越多。越接近底色，黄色越浅淡，酸的含量越少。可以在苹果酸斑点的上下沿画两条直线，这一区间就是苹果酸的显示区，其他点上这一区间的黄色深浅反映着苹果酸的含量。如果正

7、在进行苹乳发酵的样点上没有或者很少有黄色了（上部如果仍有黄色并与乳酸区紧密相连，属乳酸拖尾），说明苹乳发酵已经完成或接近完成，就可以杀菌终止发酵了。如图：附1，AB老师五项测试合并贴中关于层析法苹果酸测定的程序(我的实践帖)一)层析法测定苹果酸含量:材料:3升广口瓶,ML溶剂,ML纸,标准苹果酸溶液.洗干净手,拿纸边把长方形ML层析纸放在干净的平面上,沿纸的长边上画一道轻的铅笔线,离边1.8公分,在线上做点,间隔3-4厘米.左侧第一个点一般用于标准苹果酸.其他点用于不同的酒样品.用吸管分别取少量的待测酒样和苹果酸标准溶液.吸管尖端在

8、铅笔线上迅速分别接触一个湿点,左侧标准液,右酒液样品,湿点直径要相同(即液体量相同以便做对比定量判断),但不要超过6毫米.等湿点干了,原地再点一次,干了后再来一次.等都干了,把纸卷成筒用订书机固定成圆柱体.在广口瓶里倒入足够的ML展开