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1、葡萄组织培养育苗一、葡萄嫩梢采集与消毒将大树或杆插苗长出5—7片叶的嫩梢，取5—10厘米长，去掉幼叶。用自来水冲洗3—5分钟,在70%酒精中浸泡30—40秒钟,用蒸憾水冲洗2—3次,再放入0.5%氯化汞溶液屮消毒7-10分钟，最后用无菌水冲洗5—6次后备用。二、培养基制作与筛选(一)茎尖培养方1l/2ms培养基+6—节基嚓吟(6一ba)0.5一lppm个荼乙酸(naa)0.01ppm+水解乳蛋白(lh)100ppm+蔗糖2%+琼脂0.6%配制，氢离子浓度调到1585纳摩/升［ph5.8)o在98.06千帕的压力下，高压灭菌20分钟，冷凉待用。山东酿酒葡萄研究所用此方对白羽、红香蕉
2、、白友谊、雷司令等品种茎尖培养成活率达83.5%以上。方21/2ms培养基+赤霉索(ga)0.lppm+HiW乙酸(lba)0.59pm+6-节基嘻吟lppm+激动索(kt)O.5ppm+硫酸腺嚓吟(ade)4ppm+琼脂0.6%+蔗糖0.2%的培养基，对康拜尔芽变(康太)成活较好(辽宁省农科院植保所)o(%1)茎叶分化培养方11/2ms培养基+赤霉素lppm+眄
3、喙丁酸0.5ppm+6-节基膘吟lppm+蔗糖2%+琼脂0.6%,氢离子浓度调到1000纳摩/升(ph6.0)。在98.06千帕高压下灭菌20分钟后备用。辽宁省农业科学院植保所对贝达、红富土、黑奥林、巨峰品种族种成活率
4、达90%以上。方2用b5大量元素培养基+ms培养基其他元素+呵味乙酸(laa)0.01—0.lppm+6-节基瞟吟0.02—0.59pm+腺嚓吟(a)2；ppm或水解乳蛋白1000ppm+蔗糖2%—3%+琼脂0.7%,氢离子浓度630.9—1585纳摩/升(ph5・8—6.2),配好后装入三角瓶中,用两层硫酸纸封口，在98.06—117.67千帕的高压锅屮灭菌20分钟，冷凉待用。河南省园艺所用此配方对京早晶站种接种成活效果较好。(%1)幼根分化培养方1用bs大量兀素培养基+蔗糖4%+眄卩朵乙酸lppm+6-节基瞟吟0.08ppm+琼脂7%,氢离子浓度1000纳摩/升(ph6),经
5、高压灭菌20分钟，冷凉备用。辽宇省农业科学院植保所用此配方对红富士、黑奥林、巨峰等品种茎尖培养的单芽段，插入灭菌后的三角瓶培养基屮，芽痕高于培养基面3.5毫米，每瓶插入1—3个茎段，插后在黑暗屮培养48小吋；再转入间歇光照(两支40瓦日光灯下，每天光照10小时)培养，温度保持在23-28°C,20天后幼根平均长分别为99.0,86.3,78.0毫米。方2用1/2ms培养基+蔗糖4%+口引味乙酸0.4ppm+6-节基嚓吟0.06ppm+琼脂7%,氢离子浓度1000纳摩/升(ph6),经过高压灭菌后接种贝达、红宫土、黑奥林、臣蜂，20天后幼根平均长分别为94.0,36.5,16.8,
6、50.8毫米。此培养基对贝达繁殖有较好效果(辽宁省农科院植保所)o三、接种(茎段试管培养)在超净工作台上，将彻底消毒过的备用嫩枝剪截2厘米核的单芽茎段，将其下部插入灭菌后的试管培养基屮，芽痕高于培养基面3—5毫米，每管插1—3个茎段，在黑暗处培养48小吋，再转入间歇光照(两支40瓦口光灯下，每天照10个小时)培养，温度保持在25-28°C,以后光照吋间每天可延长12—14小时，光照强度为2000—2500勒。四、继代培养将试管苗剪成带叶单芽段，不必消毒，插人培养基屮，一般10一15天开始生根,30—35天可长成5.6片叶的小苗,在适宜条件下，1年可繁殖数万株试管苗。五、炼苗移栽试
7、管苗长成后移到温室或塑料大绷里，在自然光照下炼苗。要求温度在20-25°C,经两周后将试管塞揭开，使之接受自然光照、温度、湿度锻炼4—5天。用银子夹叶柄将小苗从培养基小取出，洗去培养基残留物，直接栽入温室或大棚屮的小拱棚里的砂壤土或粗砂里，浇透底水。棚内湿度保持在90%左右。10厘米下的地温应稳定在15°C左右，光照为4000—5000勒。15—20天后见幼叶变绿吋，即可移植到大［H,成活率达80%以上。如棚内温度过高，要通风和盖苇帘遮荫降温，喷洒凉水，提高棚内空气湿度和土壤湿度，以保持炼壮苗的适宜条件。
