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1、细胞生物学实验荧光显微镜的基本使用方法实验目的1.了解荧光显微镜的基本原理；2.掌握荧光显微镜的基本结构和使用注意事项；自发性荧光物质神经细胞和心肌细胞等内的脂褐素呈棕黄色荧光。肝贮脂细胞和视网膜色素上皮细胞内的维生素A呈绿色荧光。某些神经内分泌细胞和神经纤维内的单胺类物质（儿茶酚胺、5－羟色胺、组胺等）在甲醛作用下呈不同颜色的荧光。组织内含有的奎宁、四环素等药物也呈现一定的荧光。嗜中性粒细胞中脱氢酶辅酶呈现一定的荧光。优点：检出能力高对细胞的刺激小能进行多重染色用途：物体构造的观察荧光的有无、色调比较进行物质判
2、别发荧光量的测定对物质定性、定量分析荧光显微镜的优点和用途实验原理光源激发滤色镜分色镜发射滤色镜（阻挡滤片）实验原理荧光显微镜的光路及主要部件光源激发光挡片激发滤色镜分色镜发射滤色镜Microscopeswithanupright-styleframearecapableofproducingfluorescenceilluminationeitherthroughepiscopicordiascopicopticalpathways,althoughthelatterisrarelyusedtoday.Epi-
3、illuminatorsusuallyconsistofamercuryorxenonlamphousecoupledtoaverticalilluminatorthatispositionedabovethemainframeinaseparateassembly.Themicroscopenosepieceandtransmittedlightcomponents(diascopicilluminator,condenser,fielddiaphragm,filters,etc.)arebuiltintoth
4、emainframe,whilefluorescencecomponentsarehousedintheverticalilluminator.Theseilluminatorsoftencontainarevolvingorslidingturretthathousesfourtosix"cubes"thatcontainamixtureofinterferencefiltersincludingabarrierfilter,dichroicmirror,andanexcitationfilter.Asillu
5、stratedabove,lightemittedfromthelamppositionedintheepiscopiclamphousepassesthroughacollectorlensandthenthefieldandaperturediaphragmsbeforeenteringthefirstinterferencefilterinthecubeset,theemissionfilter.Thislightisthendirectedthroughtheobjectiveandontothespec
6、imenbyaspecialdichroicmirrorthatreflectscertainwavelengthswhilepassingothers.Secondaryfluorescence,emittedbyfluorophoresresidinginthespecimen,travelsbackthroughtheobjectiveandthedichroicmirrorbeforepassingthroughabarrierfilterandintothemicroscopeeyepiecesorca
7、merasystem.激发光源高压汞灯拥有313,337,365,405,436,546,and577纳米的峰值谱。高压Xenon灯有连续的可见光光谱范围,光源强度比较平均。汞灯光谱激发滤色块具有多套激发滤色块：激发滤色镜（ExcitationFilter），分光镜（DichromaticMirror），发射滤色镜（EmissionFilter）。激发滤色块六孔激发块转盘多用途型BX-RFA(适合多种科研要求)及通用型BX-URA2。可同时使用6种荧光激发块，“轻拨式”激发块转换功能，使不同荧光激发之间的迅速转换
8、非常方便，并可消除震动，有利于复染样品的荧光观察。激发块标识在暗室环境中发光，在暗室中也能很容易地选择需要的荧光激发块。另外，根据需要还可以选择6孔滤色片滑块(U-RSL6/U-RSL6EM)安放激发滤色片和发射滤色片进行荧光观察。BX51在镜基上装有3个滤色片（ND6，ND25，LBD），另外，还可以选装第四个。镜基侧面的拉杆可以很容易地插入/取出滤色镜。Specime
