选1-3-2(学案)月季的药培养.doc

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1、课题2月季的花药培养【教学目标】1、识记被子植物花粉发育的过程2、通过学习花药培养的基木技术，培养设计试验、动手操作、分析解释实验现象的能力【教学重点】选取适宜的培养材料和培养基【教学难点】选取适宜的培养材料和培养基基础知识一、被子植物和裸子植物1、被了植物定义：凡是种了有果皮包被着，胚珠有了房壁包被着的植物，就叫做被子植物。例：玉米、大豆、梨、杏2、裸了植物定义：凡是胚珠裸臨，外瓯没有子房壁包被，种子外血没有果皮包被的植物称为裸了植物。例：松、杉、柏3、花的结构：一朵完全花包括：、、、、和O4、花的作用：被了植物的有性生殖是在花里进行的，雌蕊和

2、雄蕊是迹行有性生殖的主要部分。二、被子植物花粉粒和卵细胞的形成1、雄蕊的结构：「花丝雄蕊彳I花药：囊状结构，内有很多花粉粒2、花药的结构「药隔：花药中部,由薄壁细胞构成，内有维管束花药』「表皮I纤维层.「花粉粒花粉囊（4或2）彳I囊壁3、被了植物的花粉发育花粉是小抱了母细胞经过分裂而形成的，因此，花粉是单倍体的生殖细胞。%1经历时期：时期、期、期。%1花粉粒的形成：花粉母细胞四分体时——►小抱子单核居屮期（小他了）>（减数分裂）单核靠边期（小饱了）►双核期（有丝分裂）4、卵细胞的形成胚珠的外层是珠被，里面是胚囊。胚骏是由胚珠内的胚囊母细胞（大砲了

3、母细胞）发冇而成。胚囊母细胞经过减数分裂，产生四个细胞，称为大砲了，每个大沦了内的染色体数目都比胚囊母细胞减少一半。这4个细胞排成一行，其屮靠近珠孔的：3个细胞退化，最里面的发冇为胚囊细胞。胚囊细胞的核连续进行三次有丝分裂，但是每次核分裂后，并不接着讲行细胞质分裂，就形成了8个细胞核的胚囊。开始，这8个细胞核分别位于胚囊的两端，每端4个，接着，每端各有1个细胞核移到胚囊的屮央，这就是极核，所以在胚變屮的8个核屮遗传物质是一样的。以后，靠近珠孔端的3个细胞核发育成3个细胞，其屮最大的一个是卵细胞，其余的是2个助细胞，另一端3个细胞核也发育成3个细胞

4、，成为反足细胞5、受精过程花粉落到雌蕊柱头上以后，在柱头上黏液的刺激下，花粉开始萌发并形成花粉管，花粉管沿着花柱向胚珠方向生长，到达胚珠后从珠孔绕过卵细胞进入胚囊，到达胚囊屮卵细胞和极核Z间，这时花粉管的前端破裂，两个精子释放出来，其屮一个精子与两个极核结合形成受精极核，另一个精了与卵细胞结合形成受精卵，这是被了植物特有的双受精现彖。、产生花粉植株的两条途径脱分化分化花药屮的花粉>从芽、诱导——►生根一►移栽脱分化再分化花药屮的花粉►芽丿五、影响花药培养的因素1、材料的选择一接种的花药时期%1选材：不同植物的诱导成功率很不相同，就同一种植物来说亲

5、木的生理状况对诱导成功率也有直接影响。选材是否成功是花药培养成功的关键%1选择介适的花粉发冇时期是提高诱导成功率的重要因素。因为并不是任何时期的花粉都可以经过培养产生愈伤组织或胚状体，花粉发冇的过程屮，只有某一个时期对离体刺激敏感。%1花药培养时期的选择一般来说，在期，细胞核时期，花药培养的成功率最高。即：最适合花线培养的小抱了发疔时期为一期。%1其它时期选择的缺点选择单核期以前的花药接种，;选择单核期之麻的花药接种，花瓣U有些松动，,且。%1单核期花药的挑选：为了挑选到单核期的花药，通常选择。,都不宜选作实验材料。%1选择完全未开放花蕾的原因：

6、%1花药培养时间一般月季的花药培养时间选在,即月季的期。初花期的花蕾营养状态及生理状态会比较好，可能捉高花粉的诱导成功率。2、培养基：花药培养基所采用的培养基可能因植物的不同而有所变化小麦屮为N6培养基，马铃蒋、月季屮为培养基，油菜屮为B5培养基。3、其他因素亲本植株的生长条件、材料的低温预处理以及接种的密度等对诱导成功都有一定的影响。六、实验操作（一）材料的选取1、方法%1最常用的方法有醋酸洋红法。%1某些植物的花粉细胞核不易肴色，需采用法，这种方法能将花粉细胞核染成色。2、醋酸洋红法%1醋酸洋红法染色机理：醋酸洋红为碱性染色剂，而花粉细胞内有

7、染色体，染色体主要成分是DNA和蛋白质，易被碱性染料着色染成红色。%1醋酸洋红的配制：将体积分数45%的醋酸100ml煮沸，缓缓加入lg洋红，在加热回流8h,冷却至50°C,过滤即可。%1染色操作：将花药放在载玻片上，加一滴质量分数1%的醋酸洋红，用银柄将花药捣碎，盖上盖玻片在显微镜下检查。3、焙花青一锯饥法%1卡诺氏尚定液的配制方法：将无水酒精与冰醋酸按体积比为3：1的比例混匀。%1焙尼青一锯锐溶液的配制方法：将5g锯明m[K2SO4Cr2（SO4）-24H2O]加入90ml蒸锚水屮,溶解后加入O.lg焙花青，混匀并加热至沸腾，煮沸5分钟后冷却

8、至室温，过滤，加蒸镉水定容至lOOmL%1染色操作：花药应该在卡诺氏間定液屮固定20min,然后取出放在载玻片上，加焙花青一锯锐溶液染色