灭螺药物对钉螺和财鱼GOT酶活力及其蛋白表达的影响研究.pdf

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1、EffectsofmolluscacidetoGOTactivityandproteinexpressionfromOncomelaniahupensisandOphicephalusargusAThesisSubmittedinPartialFulfillmentoftheRequirementForthe．MS．DegreeinBotanyByWangXinshiPostgraduateProgramCollegeofLifeScienceCentralChinaNormalUniversitySupervisor：LiWwenxinAcademicTitle：Profe

2、ssorSignature血牲ApprovedMay，2011学位论文原创性声明和使周授权说明原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师指导下，独立进行研究工作所取得的研究成果。除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律结果由本人承担。作者签名：王新力日期：2011年∥月f日学位论文版权使用授权书学位论文作者完全了解华中师范大学有关保留、使用学位论文的规定，即：研究生在校攻读学位期间论文工作的知识产权单位属华中师范大学。学校有权保留并向国家有关部门或

3、机构送交论文的复印件和电子版，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以允许采用影印、缩印或其它复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后遵守此规定)保密论文注释：本学位论文属于保密，在——年解密后适用本授权书。非保密论文注释：本学位论文不属于保密范围，适用本授权书。作者签名：≯张乃日期：2pf7年f月f日导师签名：童姆日期：少．j，7年占月厂日本人已经认真阅读“CALIS高校学位论文全文数据库发布章程”，同意将本人的学位论文提交“CALIS高校学位论文全文数据库"中全文发布，并可按“章程”中的规定享受相关权益。圃重诠塞握銮盾澄卮!旦圭生；

4、旦二生；旦三生筮查!作者签名：鲐1乃日期：训f年石月f日导师签名：日瓤：劲

5、1年6AfB摘要湖北钉螺是日本血吸虫的唯一中间宿主，药物灭螺能有效预控血吸虫病流行。NiC是WHO唯一指定、我国常用的化学灭螺药物，但存在水溶解度低、靶标／点的选择毒性差及价格昂贵等技术经济难点。因此，需要紧密结合预控血吸虫病的国家重大技术需求研发新型灭螺药物。本文以苯胺NiC和灭螺植物水溶性甾体皂甙／生物碱为供试药物，以钉螺和财鱼为靶标，探讨药物对其蛋白质表达和酶活力的影响，这为新型灭螺药物研发的先导物和特定靶点分选提供依据。1、钉螺软体和财鱼肝脏GOT酶催化最适条件的研究通过k(56)实验及极／方

6、差分析，测得钉螺软体／财鱼肝脏匀浆液GOT酶催化最适条件分别在酶液浓度0．2／0．4mg／mL、底物浓度5．0／5．0umol／L、反应体系pH7．5／8．0、反应时间60／20min及反应温度45／45℃时，其转氨基速率最高。提示物种间GOT酶催化动力学不同。这为灭螺药物对其活性影响研究提供实验依据。2、灭螺药物温孵，浸泡对钉螺和财鱼的GOT酶活力影响2．1药物温孵离体对钉螺软体的GOT酶活力浓度效应：梯度质量数的NiC和吉祥草、黄果茄及盾叶薯蓣水提取物，分别与酶温孵20min，在其0．25、0．5、0．5及2．0mg／L的酶活力诱导率最高，分别达到19．3、23．7、18

7、．9及11．52％，提示钉螺GOT酶对吉祥草甾体生物碱的敏感性最高。2．2NiC温孵离体财鱼肝脏的GOT酶活力浓度效应：梯度质量数的NiC分别与酶温孵30min，0．125mg／LNiC诱导率高达39．94％。时间效应：0．25mg／LNiC与酶经时温孵，40min温孵酶活力诱导率高达44．86％。2．3NiC染毒财鱼肝脏的GOT酶活力梯度质量的NiC浸泡染毒财鱼，1．5mg／L时财鱼死亡时间最短3．5h，GOT酶活力诱导率最大113．99％。提示NiC诱导GOT酶活力可能是其致死财鱼的靶点之一。0．5mg／LNiC染毒财鱼48h，取肝脏，运用2-DE技术及PDQuest8．

8、0．1软件分离分析，筛选出处理组有10个蛋白表达上调。这为NiC毒鱼机制及新型灭螺药物可能作用的特定靶蛋白提供一定的依据。关键词：钉螺；财鱼；NiC；植物水提取物；GOT：2一DEⅡ_________-___________●__________●_●●______________-_________●。’’。。。。。。。。。●________________。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。’———。———————————————————————————————————