阳离子影响乙烯和生长素相互作用机制.pdf

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1、Effectsofcationsoncross．．talkbetweenEthyleneandAuxinADissertationSubmittedtotheGraduateSchoolofHenanUniversityinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofScienceByCaoNnSupervisor：Prof．JiangJingDateMay2011关于学位论文独创声明和学术诚信承诺lIllliEIlllIllllllEIIIIlY1909253本人向河南大学提出硕士学位申请

2、．本人郑重声明：所呈交的学位论文是本人在导师的指导下独立完成的，对所研究的课题有新的见解。据我所知，除文中特别加以说明、标注和致谢的地方外，论文中不包括其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包括其他人为获得任何教育、科研机构的学位或证书而使用过的材料．与我一同工作的同事对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。在此本人郑重承诺：所呈交的学位论文不存在舞弊作伪行为，文责自负．学位申请人(学位论文作者)签名：2011年j月I毕日关于学位论文著作权使用授权书本人经河南大学审核批准授予硕士学位．作为学位论文的作者，本人完全了解并同意河南大学有关保留

3、、使用学位论文的要求，即河南大学有权向国家图书馆、科研信息机构、数据收集机构和本校图书馆等提供学位论文(纸质文本和电子文本)以供公众检索、查阅。本人授权河南大学出于宣扬、展览学校学术发展和进行学术交流等目的，可以采取影印、缩印、扫描和拷贝等复制手段保存、汇编学位论文(纸质文本和电子文本)。(涉及保密内容的学位论文在解密后适用本授权书)学位获得者(学位论文作者)签名：2011年箩月f牛日学位论文指导教师签名：201摘要植物生存需要众多营养元素，包括Cu、Zn、Mo、H、Mn等一些金属离子。但过量离子对植物造成毒害。植物主要依靠“阳离子／H+"转换器排出体内多余离

4、子，维持细胞离子恒稳态。IT．ATP水解酶水解提供能量驱动“阳离子／旷’’转换器，因而IT．ATP酶活性对维持植株细胞内离子平衡具有重要意义。植物激素生长素(Auxin)和乙烯(Ethylene)参与响应多种逆境环境。外源离子能够影响二者之间的相互作用，但其机制尚需很多工作。本文利用对乙烯不敏感的生长素运输因子突变体、对NaCl敏感的乙烯合成因子突变体及它们的双突变体为材料，通过RT-PCR、遗传杂交、转基因、酵母双杂交、BIFC等研究技术，初步研究了过量阳离子对生长素和乙烯相互关系的影响机制。本实验从拟南芥生物资源中心(ArabidopsisBiologic

5、alResourceCenter，ABRC)购买有关生长素运输因子的T．DNA插入突变体株系，鉴定后得到纯合体植株Atane(ArabidopsisthalianaAuxintransportmutantnotsensitivetoethylene)；同时购买了乙烯合成相关因子的T-DNA插入突变体株系进行纯合体鉴定，鉴定后得到纯合体植株Atern(ArabidopsisthalianageneforEthyleneresponsetoNaCl)利用遗传学杂交技术，得到双突变植株Atane／Atern。加拿大拟南芥资源网站(http：／／www．bar．uto

6、ronto．ca)基因芯片结果显示，NaCI处理显著改变AtANE和AtERN表达量。与此结果一致的RT-PCR结果显示：150mMNaCI处理后AtANE表达量下降，而AtERN表达量则有所上升，表明NaCI在转录水平上诱导AtERN表达量升高、AtANE表达量降低；在65mMCaCl2处理下，AtANE和AtERN表达量均有明显下降，表明NaCl和CaCl2在转录水平上调节AtANE和AtERN表达。构建AtANE：：GUS和AtERN：：GUS植株，染色实验发现AtANE和AtERN表达非常高，且从幼苗至成苗的各个部位都有明显表达。AtANE在未处理情况

7、下几乎分布于整个植株，AtERN表达也非常明显。但在65mMCaCl2处理下，染色AtANE和AtERN表达都明显下降；150mMNaCl处理抑制AtANE表达，但增加AtERN表达。这些染色结果与ImPCR结果一致。在150mMNaCI处理下，Atane和Atern萌发及根伸长受到明显抑制，证明Na+影I响Atane和Atern植株幼苗的生长发育。65mMCaCl2在一定程度上抑制了Atane和Atern萌发及植株幼苗萌发，但与野生型相比差异并不显著，说明了Ca2+对Atane和Atern植株幼苗萌发及根生长发育影响较小。H+-ATPase酶活性对植物体维持

8、胞内离子平衡很重要。测定其酶活性结果显