培养南海红树林内源真菌Fusarium sp. ZZF60产新型蒽醌衍生物.pdf

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1、第27卷第4期应用化学V01．27No．42010年4月CHINESEJOURNALOFAPPLIEDCHEMISTRYApr．2010培养南海红树林内源真菌Fusariumsp．ZZF60产新型蒽醌衍生物黄忠京。，杨瑞云郭志勇余志刚林永成¨(。广西民族大学化学与生态工程学院南宁；中山大学化学与化学工程学院广州510275；广西师范大学化学化工学院桂林；三峡大学化学与生命科学学院宜昌)摘要通过人工发酵培养，从南海红树林内源真菌Fusariumsp．ZZF60的培养液中分离得到：1种新蒽醌衍生物，6，8-二甲氧基一1一甲基-2．(3一氧丁基)葸醌(1)，以及5种已知化合物：7一羟基-3一(4一

2、甲氧基苯基)苯并-吡喃酮(2)，2，4-二羟基-6-[(1E，3E)．1．，3一戊二烯基]苯甲醛(3)，(E)4-羟基肉桂酸甲酯(4)，4·(4-羟基苯基)_2．丁醇(5)，4．羟基苯甲酸(6)。它们的结构通过MS、NMR等波谱分析推导确定。初步药理活性显示，化合物1抑制体外培养人喉癌细胞Hep2和人肝癌细胞HepG2的Ic50分别为16和23~mol／L。关键词红树林内生真菌，ZZF60，代谢产物，蒽醌，抗肿瘤活性中图分类号：0629文献标识码：A文章编号：1000-0518(2010)04-0394-04DOI：10．3724／SP．J．1095．2010．90377海洋微生物代谢产物已

3、成为开发利用海洋资源、寻找海洋药物的重要途径。红树林是生长在热带亚热带海岸潮滩湿地，以红树植物为主体的木本生物群落，具有丰富的内源真菌资源。本研究组已对我国南海红树林内源真菌中的活性物质进行了多年的研究，分离出了一批骨架新颖、生物活性较好的化合物“]。本文从南海红树林内源真菌Fusariumsp．ZZF60培养液中分离出5种已知化合物：7-羟基一3一(4一甲氧基苯基)苯并一^y．吡喃酮(2)、2，4一二羟基一6一[(1E，3E)-1-，3一戊二烯基]苯甲醛(3)、(E)4一羟基肉桂酸甲酯(4)、4．(4一羟基苯基)-2．丁醇(5)、4-羟基苯甲酸(6)和1种新的蒽醌衍生物，6，8一二甲氧基一

4、1一甲基-2一(3一氧丁基)蒽醌(1)。通过IR、MS和NMR波谱分析手段确定了它们的结构(见Scheme1)。测试了化合物1对体外培养人喉癌细胞Hep2和人肝癌细胞HepG2的细胞毒性。HOHOCH3OOHoOl23O0HHOH3HOHScheme1Thestructuresofseparatedcompounds1—61实验部分1．1仪器和试剂INOVA-500NB型超导核磁共振谱仪和INOVA-300型核磁共振仪(美国Varian公司)；DSQ电子轰2009-06-04收稿，2009-08-16修回国家“A．C~Z”计划(2006AA09Z422)、国家自然科学基金(20072058和

5、20572136)、广西自然科学基金(0832081)、广西民族大学科学研究基金(200702YJ18)资助项目通讯联系人：林永成，男，教授，博士生导师；E-mail：ceslyc@mail．sysu．edu．cn；研究方向：天然产物化学第4期黄忠京等：培养南海红树林内源真菌Fusariumsp．ZZF60产新型蒽醌衍生物395击电离质谱仪和MAT95XP型高分辨质谱仪(美国Thermo公司)；EQUINOX55一A590／3F型红外光谱仪(德国Bruker公司)；UV-2501PC型紫外和可见吸收光谱仪(日本岛津公司)；X-4型数字显示显微熔点测定仪(北京泰克仪器有限公司)，温度计未校正；

6、MuhiskanMK3型酶标仪(上海雷勃分析仪器有限公司)。细胞增殖与细胞毒检测试剂盒(MTI'法，北京赛驰生物科技有限公司)；RPMI一1640培养液(美国Gibco公司)；灭活胎牛血清(杭州四季青生物工程公司)；hep2和hepG2细胞株源自中山大学生命科学学院；石油醚、乙酸乙酯、甲醇、氯仿为工业纯试剂，使用前重蒸；葡萄糖(CR)；蛋白胨(BR)；酵母膏(BR)；粗海盐(微生物养殖用)；柱层析硅胶(青岛海洋化工厂)，49～74m，硅胶H，薄层硅胶GF内源真菌ZZF60白海南东寨港红树林保护区秋茄叶柄样品中分离，其种属被鉴定为Fusariumsp．。菌种由中山大学周世宁教授提供，保存在中山

7、大学生命科学学院。菌种以PDA为培养基，4℃保存。1．2真菌的发酵培养发酵培养基为葡萄糖1Og／L，蛋白胨2g／L，酵母膏1g／L，粗海盐2g／l,，pH=7．0的GYP培养基。在500mL三角瓶中加入250mL培养基，将其121℃(0．1MPa)高温灭菌15min。在无菌条件下，将其菌种接种于三角瓶中的培养基上，分别接种4瓶，室温培养6d，有菌体生长；再取该菌体分别接种400瓶(发酵液总体积为100L)，在