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1、系统性红斑狼疮患者外周血单一核细胞CD40L表达增加及其临床意义系统性红斑狼疮患者外周血单一核细胞CD40L表达增加及其临床意义屮华皮肤科杂志1999年第4期第32卷论著作者：邓安梅仲人前陈孙孝施笑梅孔宪涛单位:200003上海第二军医大学附屈长征医院全军临床免疫屮心（邓安梅仲人前孔宪涛施笑梅），皮肤科（陈孙孝）关键词：红斑狼疮；系统性CD40L【摘要】目的了解CD40L在SLE患者自身抗体及免疫复合物形成屮的作用。方法采用流式细胞计数仪,对10例活动期SLE、10例缓解期SLE患者外周血单一核细胞CD40L的表达进行了研究。结果活动期
2、SLE纟flCD40L表达在抗CD3单抗刺激前后均显著高于正常对照组，而缓解期SLE组T细胞在抗CD3单抗刺激前的CD40L表达在正常范围内，在刺激后显著高于正常对照组。结论SLE中CD40-CD40L途径存在缺陷，为进一步探讨SLE的发病机制提供了线索。IncreasedExpressionofCD40LonPBMCinPatientswithSystemicLupusErythematosusDENGAnmei,ZHONGRenqian,CHENSunxiao,etal.ClinicalImmunologyCenter,Changz
3、hengHospital,Shanghai200003【Abstract]ObjectiveToinvestigatetheroleofCD40Lintheproductionofautoantibodyandimmunecomplex-mediatedtissuedamage.MethodsTheexpressionofCD40LonPBMCinpatientswithactiveorremissionSLEwasexaminedbyflowcytometry.ResultsTheCD40Lexpressioninpateintswi
4、thactiveSLEincreasedsignificantlybeforeandafterthestimulationofanti-CD3mAbincomparisonwithnormalcontrols.However;theCD40LexpressioninpatientswithremissionSLEwasnormalbeforethestimulationandincreasedsign讦icantlyafterthestimulationofanti-CD3mAb.ConclusionThereisadefectofth
5、eCD40-CD40LpathwayinSLE.【Keywords]Lupuserythematosus,systemicCD40L系统性红斑狼疮（SLE）的主要病理改变是免疫复合物造成的器官和组织损伤。H身抗原特异性辅助性T细胞（Th）在病理性白身抗体的形成屮起重要作用。而Th细胞通过CD40—CD40L连接作用于B细胞，从而诱导B细胞活化、增殖,产生从IgM到IgG的抗体。为了研究CD40-CD40L途径在SLE中的作用,我们应用流式细胞计数仪，对10例活动期SLE、10例缓解期SLE患者及正常人外周血T细胞在抗CD3单抗刺激前后的
6、CD40L表达进行了分析。材料与方法（一）患者:活动期SLE患者10例，平均年龄40岁，均为女性；缓解期SLE患者10例，平均年龄45岁，均为女性。所有患者均符合1982年美国风湿病学会制定的SLE分类标准。正常对照组20例，取白献血者。（二）主要试剂和仪器:FITC标记的抗CD40L、抗CD25抗体,TRITC标记的抗CD3单抗，正常小鼠lgG（Sigma公司）。细胞洗涤液为含2%灭活小牛血清和0.01%NaN3的PBS,0.15mol/LRBS溶解液，含0.8%戊二醛固定液的PBS。稀释液：PEG600040.0g,NaF10.0g
7、,Na2HP0412H20101.5g,NaH2PO42H2O10.0g,NaN31.0g,用蒸锢水溶解丿加至1000mL,用G3玻璃滤器过滤，室温保存。流式细胞计数仪为EPICS型（美国Coulter公司产品）。（三）细胞培养:患者和正常人外周血单一核细胞（PBMC）经Ficoll-Hypaque液分离，在37°C,5%CO2屮培养，培养基含RPMI1640,10%小牛血清，160U/mL青霉素和链霉素。1X106外周血单一核细胞（PBMC）在ImL培养基屮单独或与抗CD3单抗共同孵育6h、24h、48h。（四）流式细胞术分析:取50
8、UL细胞悬液，分别加入FITC标记的抗CD40L、抗CD25单抗备20口L,在对照管中加入正常小鼠IgG20PL,混匀后置4°C30min,用PBS洗3次,弃去上清液,加固定液0.5mL,尼龙网过滤示进行流
