再生污水的大肠菌群检测方法比较研究.pdf

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1、器环境保护工程0《孽秘{鼋瓤0畦l姆姆瓣再生污水的大肠菌群检测方法比较研究潘萌，张炎，薛哲(北京城市排水集团有限责任公司，北京100164)摘要：以4个水厂的进、出水水样和一些较洁净水样作为试验对象，进行总大肠菌群、粪大肠菌群3种检测方法(滤膜法、酶底物法、多管发酵法)的对比研究，并对滤膜法中自配培养基和商品培养基的使用效果进行了对比。结果表明：滤膜法与酶底物法在水厂进、出水水样检测中无明显差异，而在某些较干净水样的检测中总大肠菌群、粪大肠菌群的数量有显著差异：滤膜法与多管发酵法在检测总大肠菌群上无显著差异；滤膜法中自配培养基和商

2、品培养基在检测总大肠菌群、粪大肠菌群数量上无显著差异。通过对比可以得出，滤膜法为现阶段大肠菌群检测方法中相对操作简便、结果准确的方法。关键词：再生水：大肠菌群；滤膜法；酶底物法；多管发酵法中图分类号：TU991．21文献标志码：B文章编号：1009—7767(2012)03—0120—03ComparativeStudyofColiformDetectionMethodforReclaimedWaterPanMeng，ZhangYan，XueZhe水是微生物广泛分布的天然环境，不论是地表水膏3g，乳糖5g，氯化钠5g，1．6％溴甲

3、酚紫乙醇溶液还是地下水，甚至雨水或雪水中，都含有多种微生物。1mL，蒸馏水加至1000mL。当水体受到人、畜粪便，生活污水或某些工业水污染品红亚硫酸钠培养基(多管发酵法)：大豆蛋白胨时，微生物的数量会大量增加。水的细菌学指标测定，l0g，乳糖10g，琼脂l0g，磷酸氢二钾3．5g，无水亚硫特别是肠道细菌的检验，在环境质量评价、卫生监督酸钠约5g，5％碱性品红乙醇溶液20mL，蒸馏水加至等方面具有重要的意义。水质监测中，总大肠菌群和粪1000mL。大肠菌群数是微生物学指标的主要内容。总大肠菌群品红亚硫酸钠培养基(滤膜法．总大肠菌群)

4、：大主要由埃希氏菌属、柠檬酸菌属、克雷伯菌属和肠杆豆蛋白胨10g，牛肉浸膏5g，酵母浸膏5g，乳糖1Og，菌属4个菌属细菌组成。这些菌属可以在人、畜粪便琼脂10g，磷酸氢二钾3．5g，无水亚硫酸钠约5g，5％中检出，有的也可以在营养丰富的水体中检．在非粪碱性品红乙醇溶液20mL，蒸馏水加至1000mL。便污染的情况下，也有检出这些细菌的可能性。粪大肠M—FC培养基(滤膜法，粪大肠菌群)：大豆蛋白胨菌群的组成与总大肠菌群相同，主要是埃希氏菌属Illn5g，胰胨10g，酵母浸膏3g，乳糖12．5g，琼脂10g，氯目前常用的大肠菌群的检

5、验方法有多管发酵法、化钠5g，1％苯胺蓝水溶液10mL，1％玫瑰色酸溶液滤膜法、酶底物法。多管发酵法适用于各种水样，大量l0mL，蒸馏水加至1000mL。重复的检定结果表明，该方法经典且数值可靠，但操以上培养基pH值调至7．2～7．4。品红亚硫酸钠、作较繁琐，需要时间较长；滤膜法操作相对简单快捷，M—FC商品复合培养基均为北京双旋微生物培养基但只适用于杂质较少的水样：酶底物法是一种较新的制品厂产品(对比实验用)。以上培养基均在115温方法，操作简单。下面利用以上方法对北京4家再生水度下灭菌20min，备用。酶底物法采用MMO—MU

6、G培厂的进出水进行对比研究，以求找出相对准确、经济、养基。便捷的检测方案。1．2仪器及玻璃器皿准备1材料与仪器试验所用仪器如下：电子显微镜、灭菌锅、恒温培1．1培养基养箱、抽滤装置、封口机、紫外灯箱。滤器湿热121灭单倍乳糖蛋白胨培养基：大豆蛋白胨10殳，牛肉浸菌15rain，玻璃器皿干热160qC灭菌2h，备用。120啼荭故木zol之No．3(May．)Vo1．30环境保护工程器驻Vl扩《》m@盏躲lProtectio~lEngir~eerirlg2试验原理与方法计数滤膜上生长的大肠菌群菌落总数，根据稀释2．1试验原理倍数计算1

7、L水样中大肠菌群数滤膜法：滤膜是一种微孑L性薄膜。将水样注入已灭总大肠菌群数(个／L)=菌的放有滤膜(孔径0．451xm)的滤器中，经过抽滤，细堕接塑种量(拿整塑×1000×稀释倍数；菌即被截留在膜上，将滤膜贴于培养基上进行细菌培mL)⋯⋯⋯⋯⋯”养。培养总大肠菌群和粪大肠菌群分别采用品红亚硫粪大肠菌群数(个／L)=酸钠培养基和M—FC培养基，因总大肠菌群可以发酵堕兰接塑种望量(堑堕整塑×1000×稀释倍数。mL)一⋯⋯⋯一乳糖，在滤膜上会出现紫红色具有金属光泽的菌落，粪2．2．2酶底物法大肠菌群则呈蓝色和蓝绿色菌落。分别计数滤膜

8、上生用无菌稀释瓶量取lO0mL理想稀释倍数水样，加长的具有上述特征的菌落数，计算出每升水样中含有的菌群数。对可疑菌落应进行革兰氏染色镜检，并接种入(2．7±0．5)gMMO—MUG培养基粉末，混摇均匀使之完全溶解。将水样全部倒入97孑L无菌定量盘内