SN 0169-1992 出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法.pdf

《SN 0169-1992 出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、SN中华人民共和国进出口商品检验行业标准sN0169一92出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法Methodforexaminationofcoliform,fecalcoliformandescherichiacoliinfoodforexport1992一12一28发布1993一05一01实施中华人民共和国国家进出口商品检验局发布中华人民共和国进出口商品检验行业标准出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群sN0169一92和大肠杆菌检验方法代替z8x09002-86Methodforexaminationofcoliform.fecalcoliformandesc

2、herichiacoliinfoodforexport主题内容与适用范围本标准规定了出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌的检验方法。本标准适用干出口食品的检验。设备和材料;.1吸管:lml-，具0.1mL刻度;5mL和lOmL，具1mL刻度。二.2水浴箱:44.5土。.5"C,23培养箱:36士1'C,44.5士0.5C.2.4冰箱:0-5℃和一15~一20C。2.5均质器。26乳钵和研棒。2.7平皿:直径90mm,2,8天平:感量。.1g,2.9显微镜。2.10稀释瓶:1OOrnL,200mL和500mL三角烧瓶及广口瓶。2.11玻璃珠:直径约5mme2,12菌

3、落计数器。3培养荃及试剂妇32月桂基硫酸盐胰蛋白舫(LST)肉汤。煌绿乳糖胆盐(BGI.B)肉汤。3EC肉汤。到伊红美蓝琼脂(EMB),35营养琼脂斜面。挑37色氨酸肉汤38MR-VP培养基。39Korser氏拘椽酸盐肉汤。结晶紫中性红胆盐琼脂(VRBA),Butterfield氏磷酸盐缓冲稀释液。:，{{生理盐水.中华人民共和国国家进出口商品检验局1992-12-28批准1993一05一01实施SN0169一92勺月月.乙J.…革兰氏染色液。lJq.曰‘JKovacs氏靛基质试剂。I月月.月J.甲荃红指示剂。，j户‘卜J，.口Voges-proskauer(V-P)

4、试剂。4样品制备4门以无菌操作取有代表性的样品。如有包装则用75%乙醇在开口处擦拭后取祥。若不能及时检验，应将冷冻样品税于一15℃保存;非冷冻而易腐的食品，应置于4'C冰箱保存。检验前冷冻样品可于2-5C18h内解冻，或在45℃以下15min内解冻。4.2不同食品样品匀液的制备4.2门液体食品以灭菌吸管取样25mL放入装有225m1稀释剂的灭菌玻璃瓶(瓶内预置适当数量的玻璃珠)，以30cm幅度、于7s内振摇25次(或以机械振荡器振摇)，制成1:10的样品匀液。4.2.2固体14t半固体食品以无菌操作取25g样品，放入装有225m1_稀释剂的灭菌均质杯内，干3000r/

5、min均质1-2min，制成1-10样品匀液(也可用灭菌乳钵研磨的方法代替)。本3稀释样品匀液根据对样品污染情况的估计，用稀释剂将徉品匀液制成一系列十倍递增的样品稀释液，如10-.10-3.10-。从制备徉品匀液至稀释完毕全过程不得超过15min.5大肠茵群的测定5.1大肠菌群MPN值的测定5-1.1对每个样品，选择适宜的三个连续稀释度的样品稀释液。每个稀释度接种三管月桂基硫酸盐胰蛋白脉(LST)肉汤，每管接种1mL.5.1.2将接种管置于36士1℃培养48士2h,5.1.3观察试管的产气情况:检查倒管内是否有气泡产生，记录在24hTa48h内产气的LST肉汤管数。如

6、所有LST肉汤管均未产气，则可报告为大肠菌群阴性;如有产气者，则进一步作证实试验。5.2大肠菌群的证实试验5.2.1将所有产气管用直径为3mm的接种环移种到煌绿乳糖胆盐(BGLB)肉汤管中。5.2.2蹬BGLB肉汤管于36士1C培养48士2h,5.2.3记录所有BGLB肉汤管的产气管数。5-2-4结果报告:按BGLB肉汤产气管数，查MPN表〔见附录B(补充件)〕报告每克(毫升)样品中大肠菌群的MPN值。6粪大肠菌群测定6.1用直径为3mm的接种环将所有48士2h内产气的LST肉汤管培养物移种于EC肉汤管中。6.2将所有接种的EC肉汤管在30min内放入带盖44.510

7、.5℃水浴箱内，培养24士2h水浴箱的水平面应高于肉汤培养基液面。应以已知为44.5℃产气阳性的大肠杆菌和44.5'C不产气的产气肠杆菌或其他大肠菌群细菌作阳性和阴性对照。6.3记录EC肉汤管的产气情况。产气管为粪大肠菌群试验阳性;不产气管为粪大肠菌群试验阴性。6.4结果报告;按产气管数，查MPN表报告每克(毫升)样品中粪大肠菌4的MP值。了大肠杆菌测定7.1将6.3条中的EC肉汤管继续培养24h，取其产气管的培养物划线接种于伊红美蓝(EMB)平板，sx0169一9236士IC培养24士2h,7.2检查平板上有无具黑色中心有光泽或无光泽的典型菌落。