基因工程的工具——酶与载体.pptx

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1、基因工程明德实验学校高二生物备课组转入水母荧光蛋白基因的猪具有编码荧光蛋白基因超级小鼠与超级鱼请欣赏能产生人胰岛素的大肠杆菌请欣赏你认为上述培育转基因大肠杆菌需要哪些工具？基因“嫁接”基因工程的基本工具分子手术刀分子针线分子搬运工限制性核酸内切酶DNA连接酶载体自主先学：阅读课本，完成导学案AATTGCCTTAAG3’3’5’5’AATTGCCTTAAGEcoRⅠ黏性末端黏性末端大肠杆菌(E.coli)的一种限制酶EcoRΙ能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。错位切SmaⅠ平末端　　　平末端限制酶SmaΙ能识别GGGCCC序列，并在G和C之间切开。平切【质疑一】限制酶能在

2、一个DNA片段的任意位置切割吗？【探究一】限制酶所识别的序列有什么特点（长度和排列顺序）学生活动一：尝试将含人胰岛素基因的DNA片段和载体DNA片段利用限制酶EcoRΙ切开提示：限制酶EcoRΙ能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开2、一个环状DNA分子含有一个限制酶切点，切割后可以得到几个长短不同的DNA片段？如果有两个限制酶切点，结果如何？三个呢？你能总结出什么规律？拓展：1、一个链状DNA分子含有一个限制酶切点，切割后可以得到几个长短不同的DNA片段？如果有两个限制酶切点，结果如何？三个呢？你能总结出什么规律？作用对象：目的基因和载体来源：主要从原核生物中分离得到作用部

3、位：磷酸与脱氧核糖之间的磷酸二酯键作用特点：有特异性。即一种限制酶只能识别一种特定核苷酸序列，并在特定的切点上切割DNA分子作用结果：产生黏性未端或平末端（1）限制性核酸内切酶——“分子手术刀”连接部位：两条链的骨架部分，形成磷酸二酯键CGGCCGTTAAAATTGCTATA（2）DNA连接酶——“分子针线”用途：连接目的基因和载体质疑二：用DNA连接酶连接切割后的含人胰岛素基因DNA片段和载体DNA时，可能出现哪些连接产物？学生活动二：小组同学尝试利用切割后的含人胰岛素基因DNA片段和载体连接成不同的DNA分子点拨：只要切割后黏性末端相同就可以相连拓展：如何避免目的基因自身环化

4、和反向连接呢？你能根据上面的结论找到办法吗？质疑三：两种不同的酶切后一定可以避免反向连接吗？探究：不同的限制性核酸切酶切割产生的黏性末端是否可以连接？学生活动三：小组同学根据上面两种酶的识别序列和切割位点，尝试切割DNA片段3和4，并判断切割后是否能够相连？点拨：不同种限制酶，只要切割产生相同的黏性末端，就可以用DNA连接酶连接，形成重组DNA分子。提示1.限制酶在DNA的任何部位都能将DNA切开吗？以下是四种不同限制酶切割形成的DNA片段:你是否能用DNA连接酶将它们连接起来？…CTGCA…G①…AC…TG②CG…GC…③…G…CTTAA④G…ACGTC…⑤…GC…CG⑥GT…

5、CA…⑦AATTC…G…⑧②和⑦能连接形成…AC…TGGT…CA…④和⑧能连接形成…G…CTTAAAATTC…G…CG…GC……GC…CG③和⑥能连接形成①和⑤能连接形成…CTGCA…GG…ACGTC…拓展训练2．如图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是（）A．①②③④B．①④②③C．①②④③D①④③②B3.下列关于限制酶的说法正确的是（）A限制酶都只识别GAATTC碱基序列BEcoRI切割的是G—A之间的氢键C一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列D不同的限制酶切割DNA后都会形成黏性末端4.DNA连接

6、酶催化的反应是（）ADNA复制时母链与子链之间形成氢键B黏性末端碱基之间形成氢键C两个DNA片段黏性末端之间的缝隙的连接DA、B、C都不正确CC