发状念珠藻细胞的光生物反应器培养（综合实验）.doc

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1、发状念珠藻细胞的光生物反应器培养（综合实验）实验指导书本实验采用20L罐式光反应器进行发状念珠藻细胞的培养，本实验是在生物工艺实验单元操作基础上,综合运用生物工程工艺原理课程中藻类植物培养方法及培养过程中全程监测、成品检测等齐个知识点，实质上是模拟工业生产上的整个过程，因此是一个综合性很强的实验。要求同学们较灵活地运用基本知识，解决实验过程中出现的问题，并在实验后系统总结获得全而提高。发状念珠藻iNostocfldgelliforme）,是一•种具有异型胞的光合固氮蓝藻，干时黑色,形如发丝，俗称发菜。发菜能够进

2、行光合作用和生物固氮，是荒漠土壤中有机碳和氮的重耍来源。发菜可以防风I司沙,防止十•壤沙漠化,对荒漠地区的环境具有重要的生态学意义。发菜营养丰富，具有食疗作用，曾是一种名贵的食用藻类和传统出口商品。然而，山于长期无计划掠夺式采收，使得有限的发菜资源濒临枯竭，草原生态环境也受到严重破坏。为此，国家明令禁止采集发菜，取缔发菜贸易，发菜已被列为国家…级保护植物。因此，开展发菜生物学特性和人工培养技术的研究，不仅具有重要的经济意义,而且具有重要的生态学意义。一、实验目的1、了解光生物反应器的操作方法。2、利用光生物反应

3、器进行发状念珠藻细胞培养。二、实验内容1.准备：（1）光生物反应器的清洗。（2）pH、DO电极的校止。2.实罐灭菌3.发状念珠藻细胞的培养（i）溶氧电极、pH电极的校止。（2）接种。（3）培养过程初始化。（4）发酵过程监测。（5）放料。（6）成品检测°三、分析方法1.生物量的测定：采用722型分光光度计测定420nm下的光密度。2.葡萄糖的测定：采用LRH250-A型生物传感分析仪测定。3.pH值的测定:采用PHS-3B精密pH计测定。4.叶绿素的测定：95%甲醇提取后,采用722型分光光度计测定665nm下的

4、光密度。5.多糖的测定：采用苯酚硫酸法测定。6.生物量测定：干燥法测定四、知识准备（1）生物反应器基本操作。（2）藻类培养方法。五、实验报告要求（1）绘制光生物反应器操作流程图。（2）绘制发状念珠藻细胞培养过程曲线。