石蜡包埋(小鼠脑组织).doc

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1、石蜡包埋第一天：固定，取材当天即把所需包埋的组织（取出后放入4%的多聚甲醛中过夜（12h）；第二天：冲水，12小时（注意水流不需要太大，不可将水流直接冲击组织）脱水，60%酒精4h白天（或者60%酒精4℃过夜12h）→第三天：→70%酒精4h→80%酒精4h→90%酒精4h→95%酒精4℃过夜(不一定12小时)→第四天：→100%酒精Ⅰ2h→100%酒精Ⅱ2h→100%酒精Ⅲ2h→透明，二甲苯Ⅰ5+3min→二甲苯Ⅱ5+3min→二甲苯Ⅲ5+3min→二甲苯Ⅳ3+2min→（此处注意，在透明过程进行到此处时，应在浸完后拿出脑组织观察一下透明是否彻底，一般来说透明完全的脑组织是

2、呈现为一个通体琥珀状，如果是发现脑组织内部仍呈现不通透的白色则继续酌情追加浸泡（透明）时间）浸蜡，软蜡Ⅰ2h→软蜡Ⅱ2h→软蜡Ⅲ2h→中蜡包埋备注：1、软蜡是指熔点48-50℃的石蜡，中蜡是指熔点58—60℃的石蜡。在包埋前应该提前将各种蜡准备好，放在对应的蜡缸里融好，注意不要加热太长时间。待蜡完全融好后关上煤气，冷却至烧杯上沿不是太烫手且蜡也未凝固是将蜡挪到６０℃温箱里备用。在融蜡时要注意通风橱使用规范。2、包埋组织块时要注意动作熟练紧凑，时间过长就会导致蜡温不够，影响包蜡质量。放组织块时要注意切面一定要放正确，待切的面朝向包埋铁框面。包埋时勿将气泡带入。可以稍微倾斜一些

3、放置塑料包埋框。3、酒精串缸结束后，可以将组织拿出一部分出来观察一下是否切面平整，是否厚薄一致，以免影响透明的整齐度，导致组织透明的时间不一致。４、酒精串缸结束后，把包埋盒用滤纸尽量弄干，然后再往二甲苯中放。5蜡块包埋完成后不要急于挪动，待蜡块凝固后再将蜡块放到－２０℃冰箱里冷藏10ｍｉｎ，以利于将铁框和包埋盒分离。