致敏树突状细胞治疗膀胱肿瘤的实验研究.pdf

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1、首届临床泌殊外科杂志国际学术会谈论定{L编参考文献【I】前列腺冷冻治疗，中华泌尿外科．2000．2l：76l一763．{2】周志耀，戴玉}日，郑世广等，根治性前列腺切除治疗前列腺癌．中华泌尿外科杂志，1993．14：163一166．13】陈明，周志耀．郑世广等，经尿道姑息性手术治疗晚期前列腺癌42例报告，中华泌尿外科，1999：20：667-669．【41KaplanSA，TeAETransorethra

2、electovaporizationoftheprostate(TVp)：Anadvanceinelectrosurgeryfoybenignprostatic

3、hyperplasiaurology，1995；45：566—568．【5】MansieldJT,StephensonRA，DosetransurethralresectionofprostatecompromisetheradicaltreatmeantofProstatecancer?SeminUrolOnc01．1996；14：174-177．【6lRubinP,SoniA，WilliamsJP．ThemolecularandcellularEiologicbasisfortheradiationtreatmentofbenignproliferatived

4、isease，SeminRadiatOncol1999；9：203—214．致敏树突状细胞治疗膀胱肿瘤的实验研究山西医科大学第一医院泌尿外科(太原，030000)刘红耀庞东梓李梦强宁松毅米振国任连生史天良张少云韩寿芝f摘要】目的：研究肿瘤抗原致敏的DCs对膀胱肿瘤的治疗作用并探讨其机制。方法：近交系F3“大鼠“只，均采用膀胱灌注N．甲基亚硝基脲(MNU)诱导成膀胱肿瘤，随机分为4组；第11周4组经皮下分别注射磷酸盐缓冲液(PBS)、未致敏DCs、肿瘤抗原及致敏DCs，每周1次，共4次；实验第15周。经显微镜、ELISA及FCM检测。结果：致敏DCs组膀胱肿瘤病理分

5、期低于PBS组和未致敏DCs组(P(o．05)；致敏DC组膀胱肿瘤病理分级低于PBS组(P

6、免疫原性弱，同时机体免疫功能差，因此免疫系统很难识别该肿瘤组织，这是引起膀胱肿瘤发生、术后复发以及转移的一个重要原因。树突状细胞(DCs)作为～种强大的抗原呈递细胞(ARC)，是近年来免疫治疗肿瘤的热点之一。肿瘤患者体内存在大量的IL-10，它可抑制DCs摄取抗原，下调共刺激分子的表达和阻断也．12的产生，而且还可能抑制DCs在肿瘤内的聚集，但不能阻止致敏Des与CTL的活性“．2J。国内外研究多采用肿瘤细胞株进行体外或皮下接种的方法，由于它与原位膀胱肿瘤有诸多不同，因此有必要进行原位膀胱肿瘤的研究。本实验采用肿瘤抗原致敏的DCs治疗大鼠原位膀胱肿瘤，．现报道如下

7、：1材料与方法1．1材料试剂rrGM．CSF、ITIL-4购自PEPROTECH公司；抗鼠CD3．F1TC、CD8．FITC、CD28-RPE试剂购自Serotec公司；rlL-2ELISA检测试剂盒、rlFN一§ELISA检测试剂盒购自美国BioSourceinternational公司；培养基RPMI1640(wim25ramHepes&L-Glutamine)购自CambrexBioScienceWalkersville．Inc．；淋巴细胞分离液购自TBD生物技术发展中心。设备FACSCalibur流式细胞分析仪为BD公司产品；Sunrise全自动酶标仪为奥

8、地利Tecan公司产品；53酋届11缶床泌尿外科袭志旧际学术会议论戈；L=绵Centra．GP8R低温离心机产自美国：CO，培养箱为Nuaire，lnc产晶。动物SPF级雌性F344大鼠．8周龄．体重I359一145g．购自北京维通利华实验动物技术有限公司1．2方法1．2．1动物模型的制备参见刘红耀的方法”l。1．2．2DCs细胞分离培养参见刘红耀的方法”】。1．2．3肿瘤抗原的制备取提前2周诱导的大鼠2只，处死，完整切取膀胱，在病变观显处取新鲜肿瘤标本剪碎．研磨，置于--80·冰箱5rnin．再置于45·水浴箱内10min，反复3次之后，离心，取上清--20·低

9、温保存．备