用抗原特异性树突状细胞激活的淋巴细胞治疗复发难治性.pdf

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1、中国实验血液学杂志JournalofExperimentalHematology2010;18(1):219-223219文章编号(ArticleID):1009-2137(2010)01-0219-05论著用抗原特异性树突状细胞激活的淋巴细胞治疗复发难治性非霍奇金淋巴瘤1孙薏,陈健,蔡鹏,呼永河,钟国成,冯怀志,闵敏,李硕,张聪1解放军第452医院肿瘤血液中心,四川成都610021;北京市道培医院,北京100049;摘要本研究探讨负载自身肿瘤裂解物的树突状细胞(dendriticcells

2、,DC)与细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokineinducedkillers,CIK)共培养后,治疗复发难治性非霍奇金淋巴瘤患者的临床免疫学疗效、毒副反应。选择9例复发难治性非霍奇金氏淋巴瘤患者,分离外周血单个核细胞,贴壁细胞体外经GMCSF和IL4诱导产生DC,并负载自体肿瘤细胞裂解物,悬浮淋巴细胞经IFN、IL2、抗CD3单克隆抗体、IL1体外诱导产生CIK细胞。7天后将负载抗原的DC与CIK共培养,12天后回输体内。利用流式细胞术、T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白(AgNORs)的检

3、测及ELISA双抗夹心法检测过继免疫生物治疗前后各项免疫指标的变化,并观察临床疗效。结+果表明:经细胞治疗后患者外周淋巴细胞AgNOR的IS值明显增高,呈上升趋势;CIK细胞培养后可见CD3+++++++CD8和CD3CD56细胞较培养前显著增加(p<0.01),负载肿瘤抗原的DC致敏后CD3CD8和CD3CD56的表达较之单纯的CIK进一步明显提高(p<0.01);将负载自身肿瘤抗原的DC与CIK共培养后,上清液中IFN、IL12的水平显著高于单独CIK对照组(p<0.05)。5例患者通过影像学

4、复查显示肿瘤较治疗前明显缩小;除一过性发热、畏寒外未见其它不良反应。结论:负载自身抗原的DCCIK细胞的具有特异性杀伤淋巴瘤细胞的能力;外周淋巴细胞AgNOR的IS值明显增高,分泌细胞因子水平高于单纯CIK细胞,临床治疗效果令人满意。关键词非霍奇金淋巴瘤;树突状细胞;细胞因子诱导杀伤细胞;肿瘤裂解物;免疫治疗中图分类号R733.1文献标识码ATherapyofRelapsedorRefractoryNonHodgkinsLymphomabyAntigenSpecificDendricC

5、ellsActivatedLymphocytes1SUNYi,CHENJian,CAIPeng,HUYongHe,ZHONGGuoCheng,FENGHuaiZhi,MINMin,LIShuo,ZHANGCongDepartmentofOncologyandHematology,The452ndHospitalofChinesePLA,Chengdu610021,SichuanProvince,China;1BeijingDaopeiHospital,Beijing100049,ChinaCorr

6、espondingAuthor:ZHANGCong,SeniorPhysician.Tel:(028)84516582.Email:cong60@hotmail.comAbstractThisstudywasamiedtoinvestigatethekillingactivityofcytokineinducedkiller(CIK)cellsafterbeingincubatedwithautologoustumorcelllysatepulseddendriticcells(DC)andto

7、evaluatetheclinicalefficacyandsideeffectofautologoustumorcelllysateloadedDCincombinationwithCIKonrelapsedorrefractorynonHodgkinslymphoma(NHL).Peripheralbloodmononuclearcells(PBMNC)wereisolatedfrom9patientswithNHL,andculturedwithgranulocytemacrophageco

8、lonystmiulatingfactor(GMCSF)andinterleukin4(IL4)toproduceDC.TheDCwerepulsedwithautologoustumorcelllysate.TlymphocytesfromPBMNCwereculturedwithinterferon(IFN),IL2,CD3moAb,andIL1toprepareCIK.Afterreceiving

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