浅析影响石蜡切片质量的关键因素

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1、中国农学通报2009,25(23):94-98ChineseAgriculturalScienceBulletin浅析影响石蜡切片质量的关键因素侯春春,徐水(西南大学生物技术学院,重庆400716)摘要:许多石蜡切片操作人员制作石蜡切片时,常出现切片碎裂、切片脱落、染色不均、模糊不清及细胞结构染色对比不明显等现象,极其影响观察。为了改善石蜡切片的质量,笔者结合国内外大量石蜡切片相关文献,综合自身体会,分析了石蜡切片过程中各环节可能出现的问题,并详述了影响其质量的关键因素,旨在为石蜡切片初学者提供一份简要、全面的石蜡切片技术操作要点。结果表

2、明,实验试剂、时间和温度的选择是影响石蜡切片质量的关键因素,控制好这三方面则可以提高切片质量。关键词:石蜡切片;质量;实验试剂;时间;温度中图分类号:S-03文献标识码:A论文编号:2009-1855AnalysisontheKeyInfluenceFactorsofParaffinSection’sQualityHouChunchun,XuShui(CollegeofBiotechnology,SouthwestUniversity,Chongqing400715)Abstract:Paraffinsectionisnotonlythe

3、mainexperimentalmethodsofhistology,developmentalbiologystud⁃ies,butalsoanimportanttoolofobservingthepathologicalchangesinpathology.It'swidelyusedinclinicalpa⁃thology,teachingandresearchwork.However,duringtheproceeding,therealwaysarisesuchproblemsassec⁃tionfragmentation,se

4、ctionoff,unevenstaining,blur,etc.,owingtomanyexperimentershaven'tbeentrainedrigorouslyandsystemically,theyarelackofexperienceandmayapplyimproperoperation.Basedonmyread⁃ingofalotofparaffinsection'srelevantliterature,combinedwithmyownexperience,inthispaper,thekeyin⁃fluencef

5、actorsofsectionsqualityweresummarizedasfollows:selectionofexperimentalreagent,timeandtem⁃perature.Thispaperalsoanalyzedthethreekeyfactors'impactandpotentialproblemsthatmayoccurineachexperimentalstep,anddetailshowtocontrolthemtoimprovethequalityofsection.Keywords:paraffins

6、ection,quality,experimentalreagents,time,temperature0引言向定量计测,将细胞组织的形态,功能及代谢相结合,石蜡切片(paraffinsection)技术是组织学、发育生从而达到定性可靠、定位准确及定量可测,使得我们能物学研究的主要实验方法,同时也是病理学中观察病很好的了解细微方面上生命变化的基本规律。理变化的重要手段,广泛地应用于临床病理诊断、教学常规石蜡切片的制作过程包括石蜡组织块制作、和科研工作中。动、植物标本的形态学观察、免疫组切片制作和染色,具体的制作过程是:取材→固定→冲化、原

7、位杂交及原位PCR等技术手段,都离不开标本洗→脱水→透明→浸蜡→包埋→切片→贴片→烤片→组织的处理和石蜡切片的制作。染色→封固。其中的每一个环节都是相互关联、一环随着新的仪器及新的研究技术的不断问世及使套一环的,任何一个环节不按规范去操作,都会影响最[1]用,石蜡切片与其他新的技术方法相结合,使传统的老终制片的质量。技术扩大了其应用范围,开辟了许多新领域,增加了许整个石蜡切片过程虽然并不复杂,但要制出优质多新的观察和研究内容;使组织学的观察研究从简单的切片,每一个操作步骤都很重要,需要不断的摸索和的形态结构深入到各种成分的定性观察,又从定

8、性转改进。那么,如何才能做出一张优质的切片呢?笔者第一作者简介:侯春春,女,1986年出生,硕士研究生。通信地址:400716重庆市北碚区西南大学639#。E-mail:spring52099

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