细菌鞭毛两种染色方法的比较研究

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1、!!!=实验室科学第13卷第2期2010年4月CN12—1352／NLAB0RAT0RYSCIENCEVo1．13No．2Apr．2010细菌鞭毛两种染色方法的比较研究宋瑛琳，王芳，田明(山东农业大学农业生物学实验教学中心，山东泰安271018)摘要：鞭毛是微生物的重要结构，对于微生物的分类有着十分重要的作用。目前，在鞭毛染色上虽有不少方法，但在一般实验条件下观察起来仍有困难。文章对石炭酸复红鞭毛染色法和石炭酸结晶紫鞭毛染色法进行了比较研究。结果发现：石炭酸复红鞭毛染色法背景清晰，80％～90％的细菌有鞭毛，菌体红色，鞭毛淡红色，染色效果

2、理想。而且，这种方法快速、有效、简便易行，更适于在实验教学中应用。关键词：细菌；鞭毛；染色中图分类号：Q93—331文献标识码：Bdoi：10．3969／j．issn．1672—4305．2010．02．037TheresearchofcomparationwithtwostainingtechniquesinstainingflagellaofbacteriaSONGYing-lin，WANGFang，TIANMing(ExperimentalAgri-biologyCenter，ShandongAgriculturalUniversi

3、ty，Tai’an271018，China)Abstract：Flagellaisanimportantstructureinmicroorganismsandplaysasignificantroleinmicrobeclassification．Therearesomewaysinstainingflagella，butitisdifficulttobeobservedingeneralex—perimentconditions．Thepapercarriesoutcomparisionbetweenbasiccarbolfuchsi

4、nstainingandbasiccarbolineumcrystalvioletstaining．Theresultsrevealsthatthebackgroundisclearwithredthalliandfaintredflagellumcanbeseenwithin80％—90％ofbacteriawhicharestainedbybasiccarbolfuch—sin．Themethodofbasiccarbolfuchsinstainingiseficient，practical，rapid，easypracticeand

5、espe—ciallysuitableforexperimentteaching．Keywords：bacteria；flagella；staining鞭毛是某些细菌的一种特殊结构，因鞭毛纤细，酸结晶紫鞭毛染色液¨』，为饱和钾明矾液5mL、直接在光学显微镜下观察不到，必须经过特殊的鞭50g／L石炭酸5mL和鞣酸液1g混合而成，临用时加毛染色，增粗鞭毛直径后再着色，才能在光学显微镜1mL结晶紫乙醇饱和液；干净载波片。下看到。然而，鞭毛染色是微生物实验中一项常用、1．2实验方法不易把握、又难以达到预期效果的染色技术，本文通(1)石炭酸复红鞭毛

6、染色法。①菌悬液的制过对石炭酸复红鞭毛染色法和石炭酸结晶紫鞭毛染备_2J：将普通变形杆菌接种在营养琼脂中，37℃培色法进行了比较，旨在探讨更适合于实验教学的鞭养18～24h，挑取培养基中迁徙生长边缘的菌苔少毛染色方法。许，加入盛有适量无菌蒸馏水的试管中，制成1．5×1材料与方法1O／L的菌悬液。②菌悬液的处理：菌悬液置37℃温箱孵育10min．③载玻片的处理：将载玻片用1．1实验材料肥皂水洗净，自来水反复冲洗，蒸馏水冲洗3次，晾菌种为普通变形杆菌，由我院微生物教研室保干，置于无水乙醇中，过夜备用。④制片方法：载玻存；普通培养基，购自武汉市

7、第二生物化学制药厂生片从无水乙醇中取出，直立于吸水纸上，吸去多余的产；石炭酸复红鞭毛染色液J，由饱和钾明矾液乙醇，然后将载玻片在乙醇灯火焰上经过2～3次即2mL、50g／L石炭酸5mL和200g／L的鞣酸液2mL混可使用(注意不能用手触摸载玻片表面)。按照文合而成，临用时加1mL碱性复红乙醇饱和液；石炭104拿骖室鞘献的方法用菌悬液制片，37~C干燥。⑤染色：制片毛染色方法。干燥后滴加石炭酸复红鞭毛染色液数滴覆盖有菌通过本实验室两个学期的教学效果比较，结果处，作用10—15min，水洗，干后镜检。显示，石炭酸复红鞭毛染色法明显优于石炭酸结

8、晶(2)石炭酸结晶紫鞭毛染色法。染色步骤同石紫鞭毛染色法。当然，在操作中还要注意一些条件炭酸复红鞭毛染色法。制片干燥后滴加石炭酸结晶对鞭毛染色的影响，本人根据几年的实践经验得出紫鞭毛染色液数滴