大豆胞囊线虫抗性候选基因Rhg1的克隆及其功能验证-论文.pdf

《大豆胞囊线虫抗性候选基因Rhg1的克隆及其功能验证-论文.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、第43卷第4期东北农业大学学报43f41：27-302012年4月JournalofNortheastAculturalUniversityApril2012大豆胞囊线虫抗性候选基因Rhgl的克隆及其功能验证高慕娟L，宋雯雯，韩雪L，王继安L(1．东北农业大学农学院，哈尔滨150030；2．大豆生物学省部共建教育部重点实验室，哈尔滨150030)摘要：大豆胞囊线虫(Soybeancystnematode，SCN)是大豆生产上一种危害严重的世界性害虫，给大豆的产量和品质造成极大的损失。大豆抗性品种选育是其防治措施中最经济、有效的方法。文章拟利用RT—PCR方法克隆得到大豆胞囊线虫抗性候选基

2、因Rhg1，通过构建植物过量表达载体pcAMBIA3301／Rhg1，并采用根癌农杆菌介导的大豆子叶节方法转化大豆东农50。PCR检测草丁膦抗性植株，表明目的基因已经整合到了大豆基因组中；实时荧光定量PCR结果也进一步证实，目的基因在转基因植株中有较高水平的表达丰度。在胞囊线虫的侵蚀下，转基因植株体内的超氧化物歧化酶含量显著高于野生型植株，而丙二醛含量低于野生型植株。研究证实了舶gl为大豆胞囊线虫的主抗基因，同时为大豆胞囊线虫的分子抗性育种提供理论基础。关键词：大豆胞囊线虫；Rhg1基因；过量表达；超氧化物歧化酶；丙二醛中图分类号：$565．1；Q78文献标志码：A文章编号：1005—9

3、369(2012)04—0027—04MolecularcloningandfunctionalidentificationofresistantcandidategeneRhgltosoybeancystnematode／GAOMujuan’一，SONGWenwen’一，HANXue27WANGJi’an’。(1．CollegeofAgriculture，NortheastAgriculturalUniversity，Harbin150030，China；2．ChineseEducationMinistry。SandProvincialKeyLaboratoryofSoybeanBio

4、logy，Harbin150030，China)Abstract：Soybeancystnematode(SCN)isaseriousanddestructivepestinsoybeanproductionworldwideandcausesgreatlossonitsyieldandquality．Ithasbeenaneconomicalandefectivemethodtobreedresistantsoybeancultivarsfordecreasingoravoidingitsdamage．ClonetheRhglgenethroughtheRT．PCRmethodandc

5、onstructedtheoverexpressionvectorpCAMBIA3301／Rhg1thatwastransformedintosoybeanDongnong50viaAgrobacterium-mediatedtransformationofcotyledona~node．Glufosinate—resistantplantsweredetectedtobepositivebyPCR．Furthermore，theRhglgeneintransgenicplantswereidentifiedtobeahighexpressionlevelthroughReal-time

6、quantifyPCR．TheSODcontentoftransgenicplantwassignificantlyhigherthanthatofwildtypes，whiletheMDAcontentoftransgenicplantwaslowerthanthatofwildtypes．TheresultsconfirmedthattheRhglgenewascrucialresistantgeneandprovidedthebasisonmolecularresistantbreedingofsoybeancystnematode．Keywords：soybeancystnema

7、tode；Rhgl：overexpression；SOD：MDA大豆胞囊线虫(Soybeancystnematode，SCN)是大豆胞囊线虫病抗性鉴定方法将小黑豆抗源的抗大威胁世界大豆生产的重要病害之一n。国内外的豆胞囊线虫病基因转育到栽培大豆中，培育农艺性研究和实践证明，利用优良的抗病品种控制大豆状优良的抗病品种，需要花费大量的人力物力，并胞囊线虫病是最经济、安全和有效的途径。我且育种周期长、效率低。国已筛选和鉴定了一批高抗大豆胞