酶法制备小分子大豆肽的蛋白酶筛选以及酶解条件优化-论文.pdf

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1、一I'ECfINIQUE『技术·油脂工程酶法制备小分子大豆肽的蛋白酶筛选以及酶解条件优化周川农’刘飞刘丹怡张欢2于殿宇2程宝晶2(1．诺利如一生物科技有限公司，北京100027；2．东北农业大学，黑龙江哈尔滨150030)【摘要】本研究对制备小分子大豆肽的蛋白酶进行筛选，并对酶解条件进行优化。综合考虑酶量对产物的水解度、平均分子量及游离氨基酸的影响，确定酶解的最佳条件为：温度55oC，pH值8．5．底物浓度为10％，分别加入1．5％的木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、无花果蛋白酶和3942中性蛋白酶，调pH值至4．5．再分别加入2．5％

2、的Fromase真菌蛋白酶和537酸性蛋白酶。结果显示，多酶复合水解可提高蛋白质降解率，并尽可能降低多肽的相对分子质量。【关键词】大豆肽；蛋白酶；水解度中图分类号：S646．1文献标识码：A文章编号：2095—6495(2014)06—0040—04EnzymaticPreparationofSmallMoleculeSoybeanPeptideProteaseScreeningandConditionsOptimizationofEnzymaticHydrolysisZhouChuannongLiuFeiLiuDanyiZh

3、angHuanYuDianyuChengBaojing(J．NutrilyBiologicalTechnologyCo．，LTD，Beijing，1000272．SchoolofFoodScience，NortheastAgriculturalUniversity，HarbinCity，Heilon~iangProvince150030)Abstract：Inthisstudy，proteinaseswerescreenedtoprepareforsmallmoleculesoybeanpeptide，andcondition

4、sofenzymehydrolysiswereoptimized．Influenceofenzymeamountonproductsdegreeofhydrolysis(DH)，averagemolecularweightandfreeaminoacidwastokenintoaccount．Resultsshowedthatoptimumconditionswere：temperature55℃，pH8．5，substrateconcentration10％，andthentheliquidmixedwithamountof

5、1．5％ofpapain，bromelain，fieinand3942neutralprotease．Next，toadjustthepHto4．5，thenliguidmixedwithamountof2．5％ofFromaseFungusproteaseand537acidprotease．Asaresult，compositeenzymehydrolyzedproteindegradationratecouldbeimprovedandasfaraspossibletoreducethemolecularmassofpe

6、ptides．Keywords：Soybeanpeptide，Protease，Degreeofhydrolysis(DH)酶法制备小分子大豆肽是目前较广泛采取的方法。豆分离蛋白后，通过控制反应条件，使制备的小分子目前工艺所制备出的大豆肽口感不好，且工业化生产大豆肽达到不产生或产生较少苦味和其他异味的效果．中的水解度不高。为了解决以上存在的问题，需要找并产生功能性小分子大豆肽_】以]。到合适的蛋白酶使其符合以下条件：蛋白酶作用于大国内有关大豆肽的生产工艺中，一般采用中性或碱性蛋白酶水解大豆蛋白，但在水解过程中，由于肽键的打开会

7、导致水解液pH值下降，为了确保蛋白酶项目墓金：2012年黑龙江增高校科技成果产业化前期研发培育项的最佳活性，都要外加碱溶液来调节水解液的pH值，目，(1252CGZH27)收稿日期：2014—03—17修改日期：2014-03—30从而提高蛋白质降解率，并尽可能降低肽的相对分子作者简介：周川农(1964一)，男，工程师，主要从事食品加工及食质量，然而，这将导致水解物在下游处理过程中，脱品设备的研究、盐除杂难度增加．不利于产品成本的降低和产品纯度通讯作者：程宝晶(1982一)，女，实验师，硕士，主要从事动物营养与饲料的研究，E—

8、mail：dyyu2000@126．cam的提高。生产中常用一种酶于30～50，不同pH值下40舷鼢工‘If版·2014．06处理．如Alcalase398蛋白酶、胰蛋白酶和菠萝蛋白1-2-2酶的分步水解酶．．目前，用Alcalase398蛋白酶与木瓜蛋白酶双酶复通过对蛋白酶