女贞不同种质材料基因组 DNA 的提取及 RAPD 引物筛选-论文.pdf

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1、安徽农业科学，JournalofAnhuiAgri．Sci．2014，42(1)：24—28，3O责任编辑石金友责任校对卢瑶女贞不同种质材料基因组DNA的提取及RAPD引物筛选赵峰，李碧英，张其文。，符伟，张恩华(1．海南广播电视大学，海南海口570228；2．海南大学应用科技学院，海南海El570228；3．海南大学农学院，海南海口570228)摘要[目的]提取女贞不同种质材料的基因组DNA，并筛选RAPD引物。[方法]采用改良CTAB法提取女贞基因组DNA，并以此种方法提取的女贞基因组DNA为模

2、板，对RAPD引物进行PCR扩增，筛选有效引物。[结果]筛选出21个多态性丰富、条带清晰且重复性好的有效引物，经检测所获得的基因组DNA条带清晰，且OD~o／ODzso在1．8左右。用筛选出的21个有效引物对126份女贞种质材料进行RAPD—PCR扩增，均可获得带型丰富且清晰可辨的DNA指纹图谱。[结论]该方法为快速和准确地应用RAPD方法分析女贞种质材料的遗传多样性提供了依据。关键词女贞(LigustrumlucidumAit．)；改良CTAB法；RAPD标记；引物筛选中图分类号Q781文献标识码

3、A文章编号0517—6611(2014)01—00024—05StudyOiltheExtractionofGenomicDNAandScreeningofRAPDPrimerinDiferentGermplasmMaterialsofLigustrumlucidumAit．ZHAOFengetal(HainanRadioandTVUniversity，Haikou，Hainan570228)Abstract[Objective]ToextractgenomicDNAindifferentgermp

4、lasmmaterialsofLigustrumlucidumandselectRAPDprimers．[Method]GenomicDNAwasextractedbyimprovedCTABmethod，andwithgenomicDNAasatemplate，PCRamplificationwasconductedonRAPDprimers．[Resuh]21effectiveprimerswithabundantpolymorphism，clearbandsandgoodrepeatabili

5、tywereobtained．AftertestingtheprivetgenomicDNAbandswereclear，andtheOD260／OD280wasabout1．8．21selectedeffectiveprimerswereusedintheRAPD—PCRamplificationfor126germplasmmaterialsofL．1ucidum．FromallofwhichtheabundantanddistinctDNAfingerprintingcouldbeobtain

6、ed．[Conclusion]ThestudywillprovideareferencefortherapidandaccurateutilizationRAPDmethodinanalyzinggeneticdiversityofthegermplasmmaterialsofLluc／dum．KeywordsLigustrumlucidumAit．；ModifiedCTABmethod；RAPDmarker；Primerscreening女贞(LigustrumlucidumAit．)是木犀科(O

7、leaceae)女贞验成本低廉等优点而被广泛应用于植物种质资源遗传多样属(Ligustrum)常绿灌木或小乔木植物，其果实、种子、树皮、性的检测、种质与品种鉴定、种间关系确定和种下划分等分叶和根均可入药，且毒性较低。女贞苦丁茶作为代茶饮料类学问题的研究。。。有效提取基因组DNA和寻找适宜的植物，性味凉、苦后回甘，具有生津止渴、抗肿瘤、护肝、调节RAPD引物是探讨女贞种质资源不同居群间的亲缘关系及免疫系统、延缓衰老、抗炎、降血脂和降血糖等多种保健作遗传多样性的关键因素。笔者提取女贞不同种质材料的基用。

8、女贞子(FRUCTUSLIGUSTRILUCIDI)中主要含有因组DNA，并筛选RAPD引物，以期为快速和准确地应用三萜类化合物、黄酮类、裂环环烯醚萜类及多糖、氨基酸、脂RAPD方法分析女贞种质材料的遗传多样性提供依据。肪酸、挥发油、色素、矿物质等多种化学成分。1材料与方法RAPD(RandomAmplifiedPolymorphieDNA，随机扩增多1．1材料分别从海南大学苦丁茶种质资源库所定植的来态性DNA)是由Williams和Welsh在1990年各自独立发现