spa胶体金免疫层析方法检测pcv2抗体的初步建立及应用

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1、SPA胶体金免疫层析方法检测PCV2抗体的初步建立及应用时建立～，战翔。，李俊，丛晓燕，孙文博，杜以军，彭酤，徐绍建，吴家强，陈蕾，郭立辉，王金宝，刘代成(1．山东师范大学生命科学院，山东济南250014；2．山东省农业科学院畜牧兽医研究所山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室，山东济南250100；3．济南市畜牧兽医局疫控中心，山东济南250000)摘要：采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒，并将其标记SPA，将金标SPA包被至玻璃纤维膜上制备金标垫，将纯化的Cap蛋白、兔抗SPA抗体分别包被至硝酸纤维素膜的检测线与质控线上，建立了一种检测猪圆环病毒2型抗体的胶体金

2、免疫层析方法。检测结果显示，组装的检测卡只与圆环病毒阳性血清发生特异性反应，检测的灵敏度可以稀释到100倍。用此检测卡与商品化ELISA试剂盒对86份I陆床血清进行平行检测，两者的检测阳性率分别为65．12％和70．93％。该方法检测速度快，15min内可出结果，特异性强，操作简便，可广泛应用于基层。关键词：SPA；胶体金免疫层析；快速诊断中图分类号：$852．659．2文献标识码：B文章编号：1005．944X(2013)09—0059．05EstablishmentandApplicationofSPAColloidalGoldImmuno-chromato

3、graphyforDetectionofAntibodiesagainstPCV-2ShiJianli，2ZhanXiang，LiJun，CongXiaoyan。，SunWenbo，DuYijun，PengJie，XuShaojian，WuJiaqiang，ChenLei，GuoLihui，WangJinbao，LiuDaicheng(1．CollegeofLifeScience，ShandongNormalUniversity，Jinan，Shandong250014；2．ResearchInstituteofAnimalScienceandVeterinar

4、yMedicine，ShandongAcademyofAgriculturalSciences，Jinan，Shandong250100；3．JinanAnimalDiseasePreventionandControlCenter，Jinan，Shandong250000)Abstract：StaphylococcalproteinA(SPA)labeledwithcolloidalgoldparticlespreparedbytrisodiumcitratereductionandthelabeledSPAwascoatedontoglassfibrousme

5、mbranetopreparegoldlabeledpad．ThepurifiedCapproteinofporcinecircovirus2andrabbitanti-SPAantibodywerecoatedrespectivelytothetestlineandqualitycontrollineonnitratecellulosemembrane，SOastoestablishacolloidalgoldimmuno·chromatographyfordetectionofantibodiesagainstporcinecircovirus一2．Ther

6、esultsindicatedthattheassembledtestcardreactedexclusivelywithPCV-2positiveseraandthetestsensitivitywasup—to100folddilutions．86clinicalsamplesweretestedbothwiththetestcardandthecommercialELISAkid，resultinginpositiveratesof65．12％and70．93％respectively．Themethodwasrapid，specificandsimple

7、inoperation，andcouldbeextendedatgrass．roots．Keywords：SPA．Colloidalgoldil'nnluno—chromatography；Rapiddiagnosis猪圆环病毒(porcinecircovirus，PCV)属分别为无致病性的PCV1和有致病性的PCV2。于圆环病毒科，是一种小的、无囊膜的单链负股PCV2主要与猪群中发生的断奶仔猪多系统衰竭综环状DNA病毒[11。圆环病毒共有2个基因型，合征(postweaningmtdtisystemicwastingsyndrome，基金项目：国家自然基金(3

8、1201889)山东省自