timp-3对肝癌细胞增殖、凋亡及侵袭转移的影响

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1、广东医学2014年1月第35卷第1期GuangdongMedicalJournalJan.2014,Vo1.35,No.I}==影·29·响一3对肝癌细胞增殖、凋亡及侵袭转移的:l:陈沅然,沈波,李瑜元广州医科大学附属广州市第一人民医院消化科、广州市临床医学研究所(510180)【摘要】目的建立以真核表达载体介导的过表达TIMP一3基因的肝癌细胞株(SMMC一7721和HepG2),探讨TIMP一3基因对两细胞增殖、凋亡、周期、侵袭等功能的影响。方法将TIMP一3质粒pCMV6一AC—GFP/TIMP一3(TIMP一3组)和空载对照质粒pCMV6一AC—GFP(对照组

2、)稳定转染入SMMC一7721和HepG2细胞株,用Westernblot技术检测细胞内TIMP一3蛋白的表达,通过MTS实验、流式细胞术、侵袭实验测定细胞的各种生物学行为。结果Westernblot检测结果显示,TIMP一3组的SMMC一7721和HepG2细胞高表达TIMP一3蛋白,而对照组细胞没有TIMP一3蛋白表达。MTS实验和流式细胞术检测结果显示,与对照组比较,TIMP一3组两种细胞的增殖能力显著减弱(第5天时P=0.003,P=0.009),凋亡率显著升高(P=0.001,P=0.038),细胞周期停滞于G2/M期(P=0.030,P=0.034);体外

3、侵袭实验结果显示,TIMP一3组两种细胞的侵袭能力较对照组显著下降(P=0.033,P=0.015)。结论TIMP一3能显著抑制SMMC一7721及HepG2细胞的增殖和侵袭能力,并诱导细胞发生凋亡和产生G,/M期阻滞.【关键词】TIMP一3;肝癌;增殖;凋亡;细胞周期;侵袭TheeffectsofTIMP一3ontheproliferation,apoptosis,invasivenessandmigrationofhumanhepatocarcinomacellline.CHENYuan—ran,SHENBo,L1一yuan.DepartmentofGastroe

4、nterology,GuangzhouFirstPeoplesHospi—tal,GuangzhouMedicalUniversity,GuangzhouInstituteofClinicalMedicine,Guangzhou510180,ChinaCorrespondingauthor:LIYu—yuan.E—mail:liyyliyy@tom.corn【Abstract】ObjectiveToconstructastableTIMP一3over—expressionhepatocellularcarcinoma(HCC)celllines(SMMC一7721an

5、dHepG2)forinvestigatingtheefectsofTIMP一3onproliferation,apoptosis,cellcycleandinva—sivenessofthetwocelllines.MethodsThepCMV6一AC—GFP/TIMP一3andemptyplasmidpCMV6一AC—GFP(contro1)werebothtransfectedintoSMMC一7721andHepG2cells.TheTIMP一3proteinwasassessedbyWesternblot.TheeffectsofTIMP一3onthebio

6、logicalbehaviorsofSMMC一7721andHepG2weretestedbyMTSassay,floweytome—try.andinvasivenessassay.ResultsOver—expressionofTIMP一3wasobservedinSMMC一7721andHepG2cellstransfeetedwithTIMP一3,whilenoexpressionofTIMP一3wasrevealedincontrols.TheproliferationandinvasivenessofSMMC一7721andHepG2cellsweresi

7、gnificantlysuppressedbyTIMP一3over—expression.bywhichsignificantlyin—creasedapoptosisrateandG2/Mcellcyclearrestwerealsoobserved(P<0.05).ConclusionTIMP一3significantlyin—hibitsthecapabilitiesofproliferationandinvasivenessofSMMC一7721andHepG2cells,inducesHCCcellsapoptosisandcausedce

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