乙肝血清学标志物与hbv-dna含量关系的分析

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1、-417·第28卷第4期实验与检验医学Vol_28No．42010年8月EXPERIMENTALANDLABORAT0RYMEDICINEAug．2010·经验交流·乙肝血清学标志物与HBV—DNA含量关系的分析郭卉，董瑶佳z，刘晓峰，陈雪礼(1、九江市第一人民医院检验科，江西九江332000；2、九江市妇幼保健医院．江西九江332000)中图分类号R446．62，R512．6~2文献标识码B文章编号1674～1129(201~04—0417—02doi：10．39695．issn．1674—1129．2010．04．050关键词：乙肝病毒；FQ—PCR；HBV—DNA1．5

2、检测方法乙型肝炎是一种严重危害人类健康的传染病．由乙型肝1．5．1乙肝五项检测『ELISA法1炎病毒感染引起。我国是乙型肝炎病毒感染高发地区，乙肝1．5．2HBV—DNA含量检测f荧光定量PCR法)。DNA提取：病毒携带者数量众多本研究旨在探讨乙肝血清学标志物与吸取血清401xl至5ml离心管中，再加入401．zlDNA提取液．HBV—DNA含量之间的关系．了解本地区乙肝感染情况．为乙充分混匀，沸水浴lOmin(误差不超过lmin1．转至4℃静置6～肝病情的临床判别和疗效评估提供理论参考8h，10000r／rain离心5rain；取上清液51,zl进行PCR反应扩I资料与方法

3、增：将点好样的PCR管置于PCR仪．93~C2min预变性．然后1．1研究对象选择2009年1月至2009年12月在江西按93℃45s一55℃60s．反应JO个循环．再按93℃30s一55℃省九江市第一人民医院门诊及住院的患者．要求于一周内进45s反应30个循环。每批PCR试验均做阴、阳性对照、临界行乙肝五项(HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb)2~HBV-阳性。检测灵敏度为I>0500IU／ml，参考范围0～500IU／mL。DNA检验，共选取1020例，年龄8～85岁。其中男652例，女1．6统计学方法所有数据采用SPSS13．0统计软件进行368

4、例。分析，多组数据之间的比较采用K—W检验．两组数据之间采1．2观察指标乙肝五项：HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、用SNK检验，HBeAg阳性和HBV—DNA阳性的相关性采用HbcAb；HBV—DNA含量。Spearnlan等级相关lI3检测仪器科华ST一360酶标仪f上海科华试验科技有2结果限公司1；DNX一9620洗板机E京普朗新技术有限公司)；DA～2．1乙肝血清学标志物与HBV—DNA的关系7600PCR扩增荧光定量检测仪f中山大学达安基因股份有限将乙肝五项检测结果分为六组。A：全阴；B：HBsAb(+)；C：公司1。HBsAg+HBeAg(+)；D：

5、HBsAg+HBeAg+HBcAb(+)；E：HBsAg+1．4检测试剂乙肝标志物检测试剂由北京万泰生物有限HBeAb+HBcAb(+)；F：HBsAg+HBcAb(+)。公司提供：HBV—DNA检测试剂由广州中山大学达安基因股从表1中可以看出HBsAg+HBeAg(+)组和HBsAg+份有限公司提供HBeAg+HBcAb(+)组的HBV—DNA阳性检出率和HBV—DNA表1乙肝血清学标志物和HBV—DNA的关系平均含量均明显高于其他各组经K—W检验对各组HBV—0．408。说明HbeAg(+)~lHBV—DNA(+)的相关性较强。DNA含量进行比较，得出HBsAg+HBeA

6、g㈩组和HBsAg+3讨论HBeAg+HBcAbf+1组与其他各组相比差异具有统计学意义从本次调查分析结果可以看出，HBsAg+HBeAg(+)和0．001)。HBsAg+HBeAg+HBcAbf+1两组的HBV—DNA阳性率明显高于2．2HBeAg阳性与HBV—DNA阳性的关系其他各组．HBV—DNA平均含量也高于其他各组，并且这两组采用Spearman等级相关计算HbeAgf+)与HBV—DNA检的HBV—DNA含量与其他各组之间的差异具有统计学意义测率的相关性，相关系数y为0．805，P

7、BsAg+HBeAg+HB—·418·第28卷第4期实验与检验医学V01．28No．42010年8月EXPERIMENTALANDIJAB0RAT0RYMEDICINEAug．2010性较低，在患者感染初期HBV—DNA含量较低，而FQ—PCR表2HBeAg和HBV—DNA检测阳性检出率比较法检测的灵敏度较高．因而应用ELISA法无法测出；(3)HB．sAg已清除，但HBV—DNA仍持续存在[41。在单独HBsAb阳性组中有4例HBV—DNA阳性检出．阳性率为7．25％，分析其原因可能为：(1)可能存在