豆豉纤溶酶载纳米脂质体的制备与表征-论文.pdf

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1、第14卷第7期中国食品学报Vo1．14No．72014年7月JournalofChineseInstituteofFoodScienceandTechnologyJu1．20l4豆豉纤溶酶载纳米脂质体的制备与表征张婵李小东王成涛(北京工商大学北京市食品添加剂工程技术研究中心食品质量安全北京实验室北京100048)摘要为提高豆豉纤溶酶口服生物利用度。建立了豆豉纤溶酶栽纳米脂质体系统，并对其表征进行评价。采用硫酸铵梯度法制备的豆豉纤溶酶纳米脂质体的包封率为(52．74~4．24)％，粒径(72．04±31．2)nm，平均Zeta电位一44．2mV，Pd

2、10．237。试验结果表明：豆豉纤溶酶纳米脂质体在体外稳定性好，在人工肠液中的释放符合一级动力学释放规律，豆豉纤溶酶在12h后释放接近完全．无突释现象。豆豉纤溶酶及栽酶纳米脂质体肠吸收液酶活性测定结果表明：豆豉纤溶酶及其栽酶纳米脂质体在小肠均有吸收，吸收后仍具有纤溶活性。纳米脂质体可有效促进豆豉纤溶酶的吸收关键词豆豉纤溶酶；纳米脂质体；包封率；粒径大小文章编号1009—7848(2014)07—0032—07脂质体作为磷脂双分子层组成，主要由磷脂的脂质体粒径、层次及包封率不尽相同。硫酸铵梯和胆固醇组成，为细胞膜固有组分，免疫原性低，度法是1种主动载

3、药法【3J，比直接pH梯度法条件体内易代谢，是理想的药物载体。纳米脂质体在提温和．避免了酶类与有机溶剂接触和大功率超声高肠吸收效率，靶向给药，缓释，降低药物毒副作对酶活影响．较适合载酶脂质体制备工艺，其原理用等方面表现出良好应用前景，尤其是在多肽、蛋是通过硫酸铵形成脂质体内外pH梯度来实现的白类口服吸收方面．可增加大肠黏附性，提高胃肠蛋白酶包封。Zhang等[41研究了胰岛素的脂质体包环境耐受性，促进肠吸收。为了减少进入血液后单被．胰岛素包封率达到50％左右，较同等条件下的细胞吞噬系统对脂质体的破坏，更好地越过血脑传统方法提高20％。Gharib等

4、【5]研究了胰岛素纳米屏障，通常选择使用单室脂质体，粒径8Onm左脂质体口服吸收效果，结果发现体内具有有效降右。Rodriguezt喇用时滞效应设计开发了口服结肠血糖能力，其认为纳米脂质体可作为促蛋白质、多定位给药系统，其认为结肠的环境条件特别适合肽类口服制剂的良好载体。Xia等同用Caoco一2细于多肽、蛋白类吸收。Rosia等嘲研究了适用于不溶胞模型研究纳米脂质体辅酶Q10肠吸收和积累促性物质、肽类的智能水凝胶控释系统．提高了载药进作用，发现纳米脂质体可以明显提高辅酶Q10纳米粒的定位吸收，缓释控制和组织靶向性等问题。口服吸收的生物利用度。目前

5、应用硫酸铵梯度主纳米脂质体载酶系统的制备方法很多．常用动包被较大分子酶的报道尚不多见。方法主要有机械分散法、两相分散法、表面活性剂豆豉纤溶酶分子质量约30ku，试验研究发现法和主动载药法。较适用于蛋白、肽类等水溶性物该酶具有较好溶栓开发效果[7-“]。本文拟制备豆豉质的包封方法主要有硫酸铵梯度法、逆相蒸发法、纤溶酶载纳米脂质体，并研究表征在制备过程中薄膜分散法、超声波法、加压法等。不同方法制备硫酸铵对于梯度形成的作用，旨在提高豆豉纤溶酶的稳定性．减少胃肠内源酶降解，有效解决豆豉收稿日期：2013—12—15纤溶酶口服生物利用度低等问题【131。基金

6、项目：教育部科学技术研究重点项目(2l1101)；北京市教委面上项目(KM201110011001)；北京市属高等学校创新团队建设与教师职业发展计划项1材料与方法目(2013113)。1．1材料、试剂与仪器作者简介：张婵，女，1984年出生，博士，讲师聚乙二醇20000．北京化学试剂公司；巴比妥通讯作者：王成涛第14卷第7期豆豉纤溶酶载纳米脂质体的制备与表征33钠，天津市光复精细化工研究所；苯基琼脂糖凝中恒温振荡孵育(25℃、100r／min)，24h内定时取胶、DEAE一琼脂糖凝胶、葡聚糖凝胶G一50，瑞典样，每次1．0mL。将样品低温高速离心(

7、10000r／Pharmacia公司；考马斯亮蓝G一250、胆固醇、琼脂min，5min)，Bradfordt41法测定上清液酶含量，计糖，国药集团化学试剂有限公司；纤维蛋白原、凝算、绘制释放曲线；分别用零级动力学方程、一级血酶，中国食品药品生物检定研究所；蛋黄卵磷动力学方程、Higuchi方程、Weibull方程拟合释放脂，北京奥博星生物技术有限公司。曲线。RV10旋转蒸发仪，德国IKA公司；S-3120蛋将收集的豆豉纤溶酶外翻肠囊渗透液装于透白纯化系统。东京理化器械株式会社：TH500一A析袋(截留量为12000～14000D)，经聚乙二醇20

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