剩余污泥生态稳定化过程中细菌群落的多样性分析.pdf

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1、第12卷第5期安全与环境学报V01.12No.52012年lO月JournalofSafetyandEnvironment0ct..2012文章编号:1009.6o94(2012)05—0086.04落解析中得到广泛应用5j,但针对污泥生态稳定化过程中微生物菌落演替变化的研究较少。本文利用PCR—DGGE技术剩余污泥生态稳定化过程中对生态稳定化过程中微生物群落的细菌的丰度、均匀度、相似细菌群落的多样性分析性进行研究,并对优势菌株进行鉴定,以揭示污泥稳定化过程中细菌的演替规律。曹阳,朴永哲,崔玉波,沈海萍,1材料与方法郭敏丽,周华成(1大连

2、工业大学生物工程学院。辽宁大连116034;1.1试验运行与采样。2大连民族学院生物工程系,辽宁大连116600;污泥生态稳定化试验用芦苇床建于大连开发区污水处理3大连民族学院环境科学与工程系,辽宁大连116600)厂,有效面积为3.0m×1.0m。床体内充填填料高度为65em,由下至上依次为炉渣20em、砾石20em、粗砂5em、细砂摘要:为了描述污泥生态稳定化过程中微生物多样性的变化趋势,20em;超高部分为65em,其作用是为污泥积存提供空间。进应用变形梯度凝胶电泳技术(PCR—DGGE)分析了不同时期、不同取泥由配泥管完成,排水管

3、位于床体底部。床内栽种芦苇,试验样位置的细菌群落变化。通过对图谱的聚类分析了不同样品的相似运行采用间歇流进泥,7d为1个周期,每周期第1d进泥。每度。计算得出香农一威纳(Shannon.Wiener)指数分别为1.93、1.89、个单元的周期进泥量为6O0L,进泥大约0.5h。系统运行第11.80、1.98、1.91、1.83、2.41、2.38、2.32,均度指数(Pielou)分别为0.62、a为调整和稳定期,历时18个周期;第2a系统从启动到结束0.58、0.65、0.62、0.67、0.68、0.74、0.78、0.72,其从3月

4、到9月均在上共运行24个周期;第3a和第4a为自然稳定期,床体内积存升,即稳定化过程中生物多样性及均匀度都在提高。利用测序后得到的污泥靠自然力进行稳定化。第4a取样初期积存污泥厚度的序列进行亲缘性比对,并结合优势种属的变化分析污泥样品细菌群约15cm,3个取样点分别设定在:底层,泥沙界面至以上2cm落的演替。结果表明,污泥不同位置的微生物群落相似度较高,不同范围;中层,泥沙界面以上(6.7±1)em;表层,泥沙界面以上时期的生物群落有一定的差异,推测污泥中生物种群与优势种属主要(134-1)em,同时在3月、6月、9月末取样。.随生态稳定

5、化不同时期而改变。序列分析以及亲缘性分析表明,优势1.2污泥总DNA提取菌株主要为放线菌门和变形菌门,有5种放线菌、5种变形菌和2种古采用优化PEG法提取DNAl6j。取3g污泥加磷酸钠缓冲细菌共12种属。其中拜叶林克氏菌和红球菌上升有利于对有机质的降解转化,假诺卡氏菌等致病菌的减少说明生态稳定化具有良好的作液混匀振荡后10000r/min离心15min,倒掉上清液。将沉淀用。生态稳定化可能对致病菌的降低以及有机质的转化等具有一定重复洗涤2次,沉淀中加8mL裂解液I(0.15mol/LNaC1,0.1的作用。mol/LEDTA,0.01g

6、/mL溶菌酶),37℃缓慢振荡1h;加8mL关键词:环境工程学;稳定化;生物多样性;变性梯度凝胶电泳裂解液Ⅱ(0.1mol/LNaC1,0.05mol/LTris—HC1,pH值为中豳分类号:Q145.2文献标识码:A8.0,10%SDS),混匀后65℃水浴中放置1h。混合液在一80DOI:10.3969/j.issn.1009.6094.2012.05.019℃和65℃反复冻融3次(每次30min),10000r/min离心10min,上清移人新管。上清中加入2.1mL裂解液Ⅲ(10%0引言CTAB,0.1mol/LNaCI)和2.7m

7、L的5moL/LNaC1,65℃放置5随着城市污水和工业废水处理量的不断增加,产生的剩min后,10000r/min离心10min,取清液;用等体积P/C/I(平余污泥也不断增多,这些污泥必须及时处理。稳定化处理的衡酚:氯仿:异戊醇体积比为25:24:1)和2倍体积C/I(氯仿:目的是降解污泥中的有机物质,进一步减少污泥含水量,杀灭异戊醇体积比为24:1)抽提;加入等体积溶液Ⅳ(13%PEG,1.6污泥中有害细菌、病原体等,消除臭味。污泥稳定化的方法主mol/LNaC1),冰中静置2h后10000r/min离心15min,弃上要有堆肥化、

8、干燥、厌氧消化等。将人工湿地技术用于污泥生清;75%乙醇洗涤,室温干燥;溶于3mLTE后,加入530/xL10态稳定(化)处理的研究和应用成为近年来的热点ll1_。该技mol/L醋酸铵溶液;室

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