药用苔藓植物银叶真藓和泥炭藓组织培养基配方研究.pdf

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1、第34卷第12期西南大学学报(自然科学版)2O1e#-12月Vo1．34No．12JournalofSouthwestUniversity(NaturalScienceEdition)Dec．20l2文章编号：1673—9868(2012)12—0061—07药用苔藓植物银叶真藓和泥炭藓组织培养基配方研究①姜山，田学武贵州师范大学生命科学学院，贵阳550001摘要：该实验用银叶真藓和泥炭藓为外植体，以不同体积质量分数的Knop培养基、微量元素、酒石酸铵和糖类为因子，采用正交试验设计的方法，研究影响两种苔藓植物配子托和银叶真藓原丝体生长的主要因子．研

2、究结果显示：①在以上4种因子中，糖类是影响两种苔藓植物生长的主要因子，葡萄糖或蔗糖的体积质量分数在接近5g／L时最有利于两种苔藓植物生长；②银叶真藓原丝体液体培养，采用未经稀释的knop培养基效果最好，而在固体培养基上培养银叶真藓和泥炭藓配子托，采用稀释2倍的Knop培养基效果最好；③酒石酸铵对泥炭藓配子托生长的影响程度仅次于糖类，是比较重要的因子．关键词：银叶真藓；泥炭藓；组织培养中图分类号：Q949．35文献标志码：A苔藓植物是现存陆生植物中的重要类群之一，约有23000余种，其种类数量仅次于被子植物口]．它隶属于高等植物中较为低等的类群，是研

3、究陆生植物进化的理想实验材料．由于苔藓植物结构简单，其拟叶往往只有一层细胞，十分便于进行细胞学研究[2]．其配子体发达，孢子体退化，是研究植物基因功能的有用材料]．另外，随着近年苔藓植物药理学和植物化学研究的深入，在苔藓植物体内发现了一些具生物活性的新结构化合物．因此，苔藓植物还被认为是一类有潜力的药用植物资源．银叶真藓Bryumargenteum隶属真藓属，为世界广布种．据《中华本草》记载，银叶真藓有清热解毒和止血的功效，对细菌性痢疾、鼻窦炎等疾病有较好疗效．另外，银叶真藓的环境适应能力较强，是研究植物抗性的理想材料．泥炭藓Sphagnum隶属泥

4、炭藓科，常见于湿润山区或沼泽中，在中国大部分山区均有分布．据《中华本草》记载，泥炭藓具清热明目和止痒的功效，对皮肤病也有较好疗效．Bown等口(1996)和Saxena等(2004)报道泥炭藓提取物可用于治疗湿疹和其他皮肤病．由于泥炭藓有较强吸水性和抗菌活性，在第一次世界大战时曾被用来代替药棉制作敷料_1．对苔藓植物进行可持续的开发应用，必须首先解决培养和繁殖问题．苔藓植物组织培养多以不同体积质量分数的Knop培养基为基本培养基[2]．PPNH培养基也常用于小立碗藓组织培养．小立碗藓作为模式植物是目前基因功能研究中应用最多和最广的苔藓植物，其组织培

5、养技术比较成熟口]．PPNH和Knop培养基的主要不同在于PPNH中加入了酒石酸铵和微量元素．另外，糖类是培养基中的主要碳源．因此，①收稿日期：2011—08—26基金项目：国家自然科学基金资助项目(30860158)；贵州省科学技术基金资助项目(黔科合J字[2008]2264)作者简介：姜山(1967一)，男，贵州贵阳人，副教授，博士，主要从事苔藓植物研究．62西南大学学报(自然科学版)http：／／xbbjb．SWU．cn第34卷本实验拟考察不同体积质量分数Knop培养基、酒石酸铵、微量元素和糖类对银叶真藓和泥炭藓生长的影响，实验结果可为筛选两

6、种植物的最优组织培养基配方提供研究数据．1材料和方法1．1植物材料采集在野外将苔藓植物及其基质一起采集后，装在牛皮纸袋中以避免失水．本研究所用植物材料银叶真藓B．argenteum采自贵州师范大学校园内(海拔980m)，泥炭藓Sl．p1alus1tre2L．2采自2贵2州省4贵4阳市4高4坡乡666(海拔1500m)．1．2方法．1．2．1培养基配制固体培养基配制时，取4个因素：Knop培养基、微量元素、酒石酸铵和葡萄糖．每个因素的体积质量分数设4个水平，用正交设计软件IIV3．1设计实验，共有16个组合(表1)．表1银叶真藓和泥炭藓组织培养基正交

7、实验设计微量元素酒石酸铵葡萄糖(或蔗糖)处理Knop／(mL．L-1)／(g·L)／(g·L一)0OO0．50O．252．51．00O．5O5．OO1．50O．757．50O．255．O00．50O7．5O1．O0O．75O1．50O．5O2．510O．5O7．5O0．50O．755．OO1．0002．5O1．50O．2500O．752．5O0．50O．5O01O．257．5O1．5OO5．OO注：1)1代表未稀释的Knop培养基，1／e，1／4和1／6分别代表Knop培养基被稀释2，4和6倍；2)表1中的数字代表每升培养基中加入微量元素储藏液的体

8、积．Knop培养基配方为：Ca(NO3)2·4H2O1g／L，FeSO4·7H2O13．5mg／L，MgSO4·7H2O0