草莓叶柄再生不定芽的研究-论文.pdf

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1、河北果树HEBEIFRUITS2014(5)草莓叶柄再生不定芽的研究王丛聪,刘思瑶(河北省石家庄市林业局050051)摘要:试验采用Hinonine、Tudla、丰香、全明星、明星花5个品种,比较不同品种叶柄再生的差异。11个植物生长调节剂组合,筛选出适合叶柄再生不定芽的最佳培养基配方,并对叶柄上、中、下不同部位的诱导率进行比较。试验结果表明:叶柄下部的诱导率比较高。Tudla这个品种叶柄再生性相对较高。对某一特定品种来说,外植体基因型和外源激素种类及其合适浓度是决定再生的主要因子关键词:草莓;叶柄;不定芽;再生中图分类号:S668.4文献

2、标识码:A文章编号:1006-9402(2o14)05-0007-02草莓(FragariaananassaDuch)是蔷薇科(Rosaceae)30d的组培苗,叶柄切成5mm的小段。草莓属(Fragaria)多年生草本果树。利用现代生物技1.2培养基及培养条件用MS无机盐、B5维生素、术可对草莓进行定向遗传改良,可建立高效、稳定的蔗糖30mg·L和琼脂7.0g·L一,加不同组合的植物离体再生体系⋯。自l990年以来,关于草莓遗传转化生长调节~IJ(PGR),调节pH值至5.8,分装到100mL的研究,国内外已陆续有了一些文献报道,草莓成为

3、的无菌广口瓶中在l21℃条件下灭菌20min,每瓶装继核桃、苹果之后第3个获得转基因植株的果树幢。30-40mL制成草莓叶柄的再生培养基。接种叶柄后,草莓的叶片和叶柄以两种方式形成再生芽,一部暗培养4d,然后转到16/8h光暗条件下培养,温度为分是由愈伤组织形成层细胞局部快速分裂形成的,一25士2℃,每两周更换一次培养基。当草莓芽苗长至部分不经过愈伤组织直接经表皮细胞脱分化形成的。l-2cm时,置MS培养基上延长生长与生根约4周柯善强等B以Alkotar幼嫩的叶片为材料离体培养,发后,开瓶炼苗1周,洗净根部的琼脂,移入装有花卉营现MS+BA

4、1.5-2.5mg.L+NAA0.1mg.L。的培养养土的小盆,置温室内,用塑料薄膜覆盖保湿1周。基上可以直接诱导不定芽,同样可继代培养丛生芽。1.3植物生长调节剂的组合植物生长调节剂分别宋国庆等H’对红丰草莓叶盘进行不定芽诱导发现MS+设定BAO.5、1.0、1.5、2.0、3.0mg·L。。,IBAO.25、0.5、BA1.0mg·L-I+IAA2.0mg·L上的叶盘成芽率最高,1.0、2.0mg·。可达到7’。/。’IBA1.薹+曼‘?.‘‘:二2结果与分析.0mg.L上的再生频率为5O.3%,在MS培一一⋯⋯养基上再生苗生根效果好。

5、张志宏等I’通过“弗吉尼2.1外植体基因型对芽分化的影响相同分化培养亚,,等品种的叶片再生研究,现TDZ与生长素类物基上不同基因型草莓外植体再生情况见表l。所用的质配合使用对叶片的再生效果明显优于6一BA。孙瑞5个品种均在芽分化培养基上培养1-2d后伤I:I出现芳等研究表明,草莓的基因型不同再生能力不同,星黑色,7d左右均能在伤1=1处形成可见愈伤组织,Tudla都一号的叶柄再生不定芽能力最强,全明星的叶片及愈伤率达到10o%,丰香、全明星、明星花、Hinonine愈叶柄再生不定芽的能力都比较强。叶柄取3~5mm长伤率达到80%以上。全明星

6、常形成粉红色愈伤组织,为宜,不定芽多从叶柄周缘愈伤组织处形成,少数可丰香愈伤形态较小并且多呈黑色,Hinonine、明星花愈从切口边缘直接再生。本研究以国内主栽草莓品种伤组织形态较小,全明星和Tudla愈伤组织致密而且为研究对象,对影响草莓叶片、叶柄再生的主要组培绿。叶柄接种后2周左右,叶柄两端伤口处可见绿色因素进行了研究,为草莓遗传转化奠定基础。愈伤组织,4周左右愈伤组织中开始分化出小芽,6周材料与方法荨蔫姜1.1试验材料试验用Hinonine、Tudla、丰香、全明3~5个,每个再生叶柄形成芽的数目则随时间的推移星、明星花5个品种的组培

7、苗,用MS+BA0.5mg·L。。+增长加快。IBA0.1mg·L。’和MS+BA0.8mg·L-J+IBA0.1mg·L。。——作增殖培养基。叶片和叶柄取自在MS培养基生长收稿日期:2014-06-05/河北果树HEBEIFRUITS2014(5)表l相同分化培养基上不同基因型草莓外植体再生情况MS+BA1.5mg·L。+IBA1.0mg·L中,上、中、下部位的出芽率可达到30%,在MS+BA1.5mg·L。+IBA0.5mg.L中再生效果也比较好,平均出芽率均能达到1.10。总的来说,Tudla的出芽情况在5个品种中是最好的,培养30d

8、左右叶柄愈伤形态最大,颜色深绿色。明星花在MS+BA1.5mg·L一+IBA0,25mg·L注:每个处理3个重复,每个重复含有10个外植体中,叶柄下部出芽率达到25%,在MS+B

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