羔羊腹泻病的微生物学诊断及防治-论文.pdf

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1、畜牧兽医杂志第33卷第5期2014年105-^●l一十●、●十～{防疫与检疫科学；●，●1●_1、1，●●—●羔羊腹泻病的微生物学诊断及防治王发仓，赵巧霞，杨杰，陈钊。，李斌。，曹丹丹(1．宝鸡市陈仓区畜牧兽医技术推广站，陕西宝鸡721300；2．西北农林科技大学动物医学院)[中图分类号]S856[文献标识码]C[文章编号]1004—6704(2014)05—0105—02从陕西某羊场腹泻羊的粪便中，无菌操作采取样该养殖场羔羊腹泻是由于气候突变及羔羊在圈品3份，2～4h送实验室进行微生物学诊断，从中分外饮用污水，导致部分羔羊发生腹泻。临床症状为离出1株革兰阴

2、性中等大小杆，经生物学特性试验和精神倦怠，食欲减退，腹泻，脱水，轻度贫血。并未发生理生化试验鉴定，该分离到的细菌为致病性大肠埃生死亡。希氏菌，血清学鉴定为0114型。药敏试验结果表明，1材料和方法对氨曲南、大观霉素、头孢噻肟高度敏感；对米诺环素、克林霉素、克拉霉素有耐药性。24h肉汤培养物1．1材料对小白鼠有致死性，外毒素0．2mL对小白鼠尾静脉普通琼脂平板、绵羊脱纤鲜血琼脂平板、普通肉注射有致死性。绵羊血琼脂平板呈0溶血。汤、各种糖发酵管均按参考文献[8]中介绍的方法制大肠埃希氏菌(Escherichiacoli)，俗称大肠杆备；药敏纸片购自某微生物试剂有

3、限公司；小白鼠由菌，。该菌常存在于动物和人的肠道内，大多数情况西北农林科技大学实验动物中心提供；肠道致病性下是不致病的共栖菌，少数大肠杆菌对人和动物的大肠埃希氏菌诊断血清购自某生物药业有限公司。有病有致病性，称为病原性大肠杆菌。这些病原性1．2方法大肠杆菌，对人和动物具有致病性，尤其对婴儿和幼1．2．1采样将腹泻羊肛门周围进行彻底清洗，并畜(禽)，常引起严重腹泻和败血症。随着大型集约用75的酒精棉签消毒，将蘸有无菌肉汤的棉签化养畜(禽)业的发展，病原性大肠杆菌对畜牧业所在肛门内5～8cm采取粪便，迅速放人无菌肉汤内，造成的损失已日益明显。可引起仔猪黄白痢、仔

4、猪送检。水肿病、幼畜(禽)的出血性肠炎、败血病等。1．2．2细菌的分离和培养将采取的棉签肉汤培羔羊腹泻是一种常见的消化道疾病，也是引起养物充分混匀后涂片，革兰氏染色镜检。对采集的羔羊死亡的重要原因之一，发病率可达3O9／6，死亡棉签肉汤划线接种于普通琼脂平板、麦康凯琼脂平率达2O。该病是由多种原因引起的包括：病毒性板、绵羊血琼脂平板，37℃培养24~36h，从中分离腹泻，细菌性腹泻如大肠杆菌、B型魏氏梭菌、沙门到1株』3溶血，革兰氏染色阴性中等大小的可疑细菌，将纯化后的细菌接种到普通斜面，37℃培养24氏菌等，寄生虫性腹泻，母羊自身问题如患有乳房炎、妊娠毒血

5、症、体质差导致乳汁质量下降等，羔羊～36h，4℃保存菌株待检。1．2．3生物学特性和生化试验将分离菌分别接自身免疫力低下、消化机能不健全，各种应激因素如种普通琼脂平板、绵羊鲜血琼脂平板、麦康凯琼脂平气候突变、惊吓等，饲料原因如营养搭配不当、饲料板、普通肉汤中，37℃培养24~36h。霉变等，羔羊管理不规范等。患病羔羊多表现精神沉郁，饮食欲减退或废绝，体温升高至4O℃以上；开将分离纯化的细菌分别接种甘露糖、肌醇、乳糖、山梨糖、阿拉伯糖、D一木糖、D(+)棉籽糖、海藻始排稀软的粪便，严重者呈水样腹泻，粪便中常混有糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、鸟氨酸和赖氨酸等发酵凝乳

6、块、未消化的饲料、气泡或粘液；羔羊迅速脱水，管，分别接种三糖铁琼脂斜面、尿素琼脂斜面、石蕊若不及时治疗极易死亡，部分羔羊有神经症状；有些牛乳、葡萄糖蛋白胨水、蛋白胨水、柠檬酸盐琼脂斜病例治愈后出现发育不良、生长缓慢的现象。面等生化试验管，37℃培养24~36h。[收稿日期]2014—03—191．2．4药敏试验按参考文献E8-1中介绍的纸片法[作者简介]王发仓(1961一)，男，陕西宝鸡人，大专，助理畜牧师，主要从事畜牧技术推广工作。对分离菌进行药物敏感性试验。106JournalofAnimalScienceandVeterinaryMedicineVo1

7、．33No．520141．2．5分离菌外毒素致病性试验将分离到的纯素中度敏感；对米诺环素、苯唑西林、氨苄西林不菌接种到血清肉汤中，在37℃培养24～36h，对肉敏感。汤培养物涂片镜检，检验纯度。在无菌条件下，用孔表1分离菌株生化试验结果径为0．2m双层滤膜的滤器过滤，得到含外毒素的滤液。滤液经细菌分离培养检验，不含大肠埃希氏菌及其他细菌，将验纯后的滤液尾静脉接种小白鼠0．2mL／R，观察结果。1．2．6小白鼠致病性试验将分离到的纯菌接种至血清肉汤，37℃培养24h，将肉汤培养物涂片镜检检验纯度，测得菌量为7．5亿／mL，小白鼠腹腔注射，每只分别为0．3mL，

8、0．4mL，0．5mL。对照组腹腔注射0．5mL血清