基于DNA条形码对凉山虫草及近缘物种和其混伪品的分子鉴定-论文.pdf

《基于DNA条形码对凉山虫草及近缘物种和其混伪品的分子鉴定-论文.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、世界科学技术一中医药现代化★中药研究基于DNA条形码对凉山虫草及近缘物种和其混伪品的分子鉴定六陈抒云，曹树萍，袁航，过立农，郑健。，林羽，陈丹★，林瑞超(1．福建中医药大学药学院福州350108；2．北京中医药大学中药学院北京100102；3．中国食品药品检定研究院中药民族药检定所北京100050)摘要：目的：结合ITS基因和COI基因对《四川省中药材标准》收录的凉山虫草和近缘物种及当地市场上出现的混伪品进行分子鉴定，考察其方法的可行性。方法：对收集的28份样品通过DNA提取、PCR扩增，分另·j获得其ITS序列和COI序列。用CodonCo

2、deAlignerV3．7．1，Mega5．0等软件进行比对分析，构建基于ITS序列和COI序列的样品的NJ树，进行聚类分析。结果：凉山虫草和近缘物种及混伪品寄生真菌的ITS序列种间最小K一2P距离大于各物种种内最大K一2P距离：种内变异小，种间差异较大，从而基于ITS序列的NJ树能将凉山虫草与其他近缘物种及其混伪品很好地归属；凉山虫草和近缘物种及其混伪品寄主昆虫的COI序列种间最小K一2P距离大于各物种种内最大K一2P距离：种内变异小，种间差异较大，通过遗传距离及NJ树的分析能将凉山虫草与其他近缘物种其及其混伪品及其他近缘物种很好地区分。结

3、论：结合ITS序列和COI序列的DNA条形码技术可以很好地鉴定凉山虫草与其近缘物种及其混伪品，并对虫草属的系统学和分类研究提供了技术支持。关键词：凉山虫草混伪品ITS序列COI序列DNA条形码doi：10．1l842／wst．2014．06．024中图分类号：R282．5文献标识码：A凉山虫草为麦角菌科真菌凉山虫草菌『0_代正品虫草使用，《四川省中药材标准》1987年版cordycepsliangshanensis(M．Zang，D．Liu&R．Hu)(增补本)收载了凉山虫草。除冬虫夏草外，在民间G．H．Sung，J．M．Sung，Hywel

4、—Jones&Spatafora[1寄还有一些虫草的近缘物种常亦于药用，如亚香棒、生在鳞翅目幼虫上的子座及幼虫的干燥复合体f21，戴氏虫草等。鉴于民间对于虫草物种的鉴别不清，以四川、云南等省区为其主产区，分布于海拔l500m且不同虫草的化学成分和药理作用也不同，这些虫左右的筇竹林下。其药性甘，味平，归’肾、肺经，具有草物种的混用容易造成用药安全隐患。补肺益肾的功效。凉山虫草分布海拔较低、对生态雷波县位于四川省凉山彝族自治州内，在当地环境要求不高，资源量丰富，极有可能发展成为一调研时发现市场上出现另一虫草品种形态类似于种优良的冬虫夏草替代资源p

5、1。在民间，当地人将其凉山虫草，当地民众无从鉴别而将其以凉山虫草出当作正品虫草人药使用。基于凉山虫草与冬虫夏草售。经专家鉴定后认为，其虫草为凉山虫草的混伪在功效上的相似性，在四川、云南等地将凉山虫草品，当地俗称之为“金虫草”。从外观性状上观察到其虫体表面附有大量棕褐色或黄褐色的菌丝膜，去收稿日期：2014-01-06修回日期：2014-02-23除体表膜制物后虫皮呈暗红棕色，具假薄壁组织皮★国家自然科学基金委青年基金项目(81102767)：虫草属真菌抗肺纤维化的活性成分及作用机制研究，负责人：郑健。★★通讯作者：陈丹，教授，主要研究方向：药

6、物分析与中药制剂分析；林瑞超，教授，主要研究方向：中(草)药有效成分，中药质量标准，中药化学标准。[0ScienceandTechnology~odemizationofTraditionalChineseMedicineandMateriaMedica]1336世界科学技术一中医药现代化★中药研究凉山虫草Metacordycepsliangshanensis2013-9-20四川凉山彝族自治州雷波县KJ021169／KJ0212132013-9-21四川凉山彝族自治州雷波县KJ021170／K．1『0212142013—9—22四川凉山彝族

7、自治州雷波县KJ021171／KJ0212152013-9-20四川凉山彝族自治州雷波县KJ021172／KJ0212162013-9-2I四川凉山彝族自治州雷波县KJ021173／KJ『0212172013-9-22四川凉山彝族自治州雷波县KJ021174／KJ『0212182oo9-7安国药材市场KJ021175／KJO21219u"叭￡；20∞09-10南通∞所提傩供一一mmKJ021176／—KJ021220；2冬虫夏草Cordycepssinensis2013-5-22青海果洛玛沁县KJ021182／KJ0212002013-5-2

8、2青海果洛玛沁县KJ021183／KJ0212012O13-5-22青海果洛玛沁县KJ0211841KJ『0212022013-5-27青海玉树州杂多县KJ0211