不同品种犊牛血清对3T3-L1前脂肪细胞增殖与分化的影响-论文.pdf

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1、中国草食动物科学2014拄doi:10.39696.issn.2095—3887.2014.03.008不同品种犊牛血清对3T3一L1前脂肪细胞增殖与分化的影响何阳,宋沙,薛志杰,曹晖,曹兵海(1.中国农业大学动物科学技术学院,动物营养国家重点实验室,北京100193;2.秦宝牧业)摘要:试验以3T3一L1为模型细胞,通过研究不同品种犊牛血清对其增殖与分化的影响,为早期确定牛是否具有育肥价值提供一种新思路。选取50头秦和犊牛、5O头安和犊牛和8头夏洛莱杂交犊牛,颈静脉取血制备血清。试剂盒检测细胞增殖相对数,油红0检测脂肪含量,用比

2、色法测定三磷酸甘油脱氢酶(GPDH)和脂肪酸合成酶(FAS)活性。结果表明:①在细胞增殖方面,在增殖的第1天3个品种杂交牛无显著差异(尸>0.05);在增殖的第2、4、6、8天夏杂牛极显著高于秦和牛(P<0.01),显著高于安和牛(0.05),而安和牛在第2天和第6天又极显著高于秦和牛(P<0.05);在增殖的第10天夏杂牛显著高于秦和牛(P<0.05),而夏杂牛与安和牛、安和牛与秦和牛之间均无显著性差异(P>0.05o②在细胞分化方面,安和牛血清培养细胞分化的脂肪含量在第2、4、6、8、10、12天显著高于夏杂牛和秦和牛(P<0

3、.05);秦和牛血清培养细胞分化的脂肪含量在第2、4、6、8、10天又显著高于夏杂牛(P<0.05),第12天没有显著性差异(P>0.05)。③分化第lO天检测细胞内GPDH和FAS酶活性,安和牛血清培养的细胞组中的GPDH极显著高于夏杂牛(P<0.01)和秦和牛(P<0.01),FAS活性极显著高于夏杂牛(P<0.01),显著高于秦和牛(P<0.05);夏杂牛血清培养的细胞组中的GPDH显著高于秦和牛(O.05),而FAS的活性两者间没有显著性差异(尸>0.05)。结果显示:牛血清品种是影响前脂肪细胞增殖与分化的因素,夏杂牛血清

4、更有利于前脂肪细胞的增殖,而安和牛血清更有利于前脂肪细胞的分化,但作为确定牛是否具有育肥价值仍需进一步研究。关键词:犊牛血清;3T3一LI前脂肪细胞;增殖与分化中图分类号:$823.1文献标志码:A文章编码:2095—3887(2014)03—0026—04建立在肉牛生长发育早期就能快速、准确地检测与分化活性的研究中,一般将3T3一L1前脂肪细胞系作为评估肉牛育肥效果及牛肉品质的方法,是提高生产效标准模型细胞,如研究肥胖、糖尿病的模型细胞],在培率、准确满足消费者的肉质需求、提高产业效益的途径养基中添加各种物质用以研究脂肪合成代谢

5、的机之一。为达到这一目的,已用超声波活体测定背膘厚和理Is-n],但几乎所有研究所使用的培养基都含有血清,说眼肌面积,并在牛肉的大理石纹和嫩度的基因标记等明血清是影响前脂肪细胞分化的重要因素_l2]。血清中含技术领域进行研发应用。有细胞生长所必需的营养成分,这些成分在体外可以再肌间脂肪组织是影响牛肉品质的重要因素之一,前造适于细胞生长、繁殖、黏附和分化的生理环境,决定脂肪细胞的分化活性又是影响脂肪组织发育的决定因细胞的生长效果lJ。不同品种的胎牛血清对细胞增殖有素,而前脂肪细胞的分化活性一般受脂肪酸合成酶影响,说明牛的血清成分对前

6、脂肪细胞分化活性的影(FAS)、三磷酸甘油脱氢酶(GPDH)、过氧化物酶体增殖物响在品种间有差异,由此推测血清成分的活性很可能受激活受体(PPARs)等因素的影响[。在有关前脂肪细胞品种遗传性能支配,继而影响前脂肪细胞的分化活性,从而影响牛肉中的脂肪沉积效果。如果这个推断成立,彀镊毽强

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10、t。一则使用不同品种的犊牛血清培养3T3一L1前脂肪细胞标基金项摩瘸家l牛牦Ⅱr拄I术德nARs3酚l礴方媲区藜家誊育月巴l岛离准模型,就有可能鉴别各品种牛的前脂肪细胞的分化活露辍箍撩硪爨忿獬警

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16、性,从而对肉牛的牛肉品质

17、在生长早期做出鉴别提供另镛卷筒食辍

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22、。。通潞作蔷j甍买海睦鉴导蛳鼍甏镄蛰穗爨毪鼹赣甓巍。一i。一种思路。第34卷第3期繁殖与生理为此,本试验采用3T3一Ll前脂肪细胞作为模型细NADPH溶液0.04mL,7.25mmol/L乙酰辅酶A溶液胞,用不同品种牛血清作用于细胞,研究了不同品种犊0.04mL,40℃的Cook—tailSolution缓冲溶液1.4mL,上牛血清对前脂肪细胞增殖与分化的影响。清液0.08mL,混合均匀后,再加入3.51mmo1]L丙二酸单1材料与方法酰辅酶A溶液0.08mL,迅速震动混合后

23、,用紫外分光光1.1试验材料度计(El本岛津制作所)在340nm条件下测1min吸光3T3一L1前脂肪细胞购自国家细胞资源中心。犊牛血度变化。蛋白浓度采用考马氏亮蓝蛋白定量试剂盒测清采自陕西秦宝牛场的108头牛,所有牛都在5~7月龄,定。1u酶活相

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