实验室常用药品试剂的配置与使用.pdf

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1、实验室常用药品试剂的制备与使用(一)认识药品规格纯度规格简写标签颜色级别特点实验纯L.R黄色四主成分含量高，纯度较差，杂质含量不做选择化学纯C.P蓝色三主成分含量高、纯度较高，存在干扰杂质分析纯A.R红色二主成分含量很高、纯度较高，干扰杂质很低优级纯G.R绿色一主成分含量很高、纯度很高，有的可作为基准物质(二)染色试剂的配制1.甲基绿（DNA—绿色）和吡罗红（RNA—红色）染色剂配制：a)A液：取甲基绿2g溶于98mL蒸馏水中，取吡罗红G5g溶于95mL蒸馏水中。取6mL甲基绿溶液和2mL吡罗红溶液加入到16mL蒸馏水中，置于棕色瓶中备用。b)B液：是一种缓冲液

2、，由乙酸钠和乙酸混合而成。先取乙酸钠16.4g，用蒸馏水溶解至1000mL备用；再取乙酸12mL，用蒸馏水稀释至1000mL备用。取配好的乙酸钠溶液30mL和稀释的乙酸20mL，加蒸馏水50mL，配成pH为4.8的B液（缓冲液）。c)取A液20mL和B液80mL混合，就是实验中所用的吡罗红甲基绿染色剂。应该注意的是该试剂应现用现配。2.I2-KI溶液（淀粉—蓝紫色，蛋白质—黄色）配制：将碘化钾3g溶于蒸馏水中，待全部溶解后加入碘1g，振荡使其溶解，将此液保存在棕色玻璃瓶内。1/83.苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ（木栓化、角质化细胞壁—红色，脂肪、挥发油、树脂等—红色或淡红色）

3、配制：苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ干粉0.1g与95%乙醇10mL混合，过滤后再加入10mL甘油。4.1%醋酸洋红染料（染色体—紫红色）配制：将洋红1g与45%醋酸100mL煮沸2h左右，并随时注意补充加入蒸馏水到原含量。冷却后过滤，加入4%铁明矾溶液1~2滴，放入棕色瓶中备用。5.龙胆紫酸性染料（染色质—紫色）配制：取龙胆紫1g，溶于少量2%醋酸溶液中，滴加2%醋酸溶液，直至溶液不呈深紫色为止。6.卡宝染色剂（染色体—红色，着色深，保存性好）又名苯酚-品红染色剂配制：a)原液A：将3g碱性品红溶于100mL70%的乙醇中。b)原液B：取原液A10mL加入到90mL5%苯酸水

4、溶液中。（两周内有效）c)原液C：取原液B55mL，加入6mL福尔马林和6mL冰醋酸。d)染色剂：取原液C10~20mL，加45%冰醋酸80~90mL，加山梨醇1.8g，将其配制成10%~20%的苯酚-品红溶液，放置两周后，效果显著。7.本尼迪克溶液（醛糖或醛—黄红色沉淀）又称班氏试剂配制：a)硫酸铜溶液：在50mL加热的蒸馏水中溶解8.5g硫酸铜；b)柠檬酸钠-碳酸钠溶液：在400mL蒸馏水中溶解85g柠檬酸钠和50g无水碳酸钠；2/8c)将硫酸铜溶液缓缓倒入柠檬酸钠-碳酸钠溶液中，边加边搅拌并过滤沉淀物。8.斐林试剂（醛糖—砖红色沉淀）配制：a)甲液（0.1

5、g/mLNaOH）：将125g氢氧化钾（钠）和173g酒石酸钾钠溶解在500mL蒸馏水中。b)乙液（0.05g/mLCuSO4）：将34.5g硫酸铜溶于500mL蒸馏水中。c)上述两种溶液应分别保存。在检测葡萄糖时，使他们等量混合，加入待测物的试管内，加热到沸腾。如果有葡萄糖，会形成红色的氧化亚铜沉淀物。9.米伦试剂（含有Tyr的蛋白质—红色沉淀）配制：在60mL浓硝酸（比重1.42)中溶解40g汞（水浴加温可助溶），溶解后加入两倍体积的蒸馏水稀释，静置澄清后，取其上层的清液备用。10.中性红溶液（活细胞—红色）配制：将0.1g中性红溶于100mL蒸馏水。使用时

6、，再稀释10倍左右。11.曙红Y乙醇（细胞质—浅红色）配制：将0.25g曙红溶于100mL95%乙醇。12.钌红染色剂（胞间层—红色）配制：将5~10mg钌红与蒸馏水25~50mL混合。现配现用。13.苯胺蓝溶液（纤维素细胞壁、鞭毛等—蓝色）配制：将苯胺蓝1g溶于0100mL35%或95%的乙醇中。14.间苯三酚溶液（木质素—红色）配制：将间苯三酚5g溶于100mL95%乙醇。溶液呈黄褐色即失效。3/815.番红染色剂（细胞壁、花粉外壁和染色质—红色）配制：a)番红水溶液：将1g番红溶解到100mL蒸馏水中。b)番红乙醇：将1g番红溶解到100mL50%或95%

7、乙醇中。c)苯胺番红乙醇染色液：i.甲液：番红5g+95%乙醇50mLii.乙液：苯胺20mL+蒸馏水450mLiii.将甲、乙两种溶液混合后，充分摇均，再过滤。16.固绿溶液（细胞质、细胞壁—亮绿色）配制：a)固绿乙醇溶液：将1g固绿加入100mL95%的乙醇中。b)苯胺固绿乙醇溶液：将1g固绿加入40mL95%乙醇中，再加入10mL苯胺。充分摇匀后过滤。17.铁矾苏木精染液（细胞分裂时染色体—蓝黑色）又称海登汉氏苏木精染色液甲液（媒染剂）：硫酸铁铵（铁矾）2~4g+蒸馏水100mL（现配现用）乙液（染色剂）：苏木精0.5~1g+95%乙醇10mL+蒸馏水90

8、mL乙液配制：（1）苏木