Q3通道电流的影响.pdf

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1、中华麻醉学杂志2013年8月第33卷第8期ChinJAnesthesiol,August2013,Vo1.33,No.8·麻醉并发症·不同浓度氯普鲁卡因对HEK2936细胞KCNQ2/Q3通道电流的影响秦士吉李军李红李明张凡赵森明程艳欣【摘要】目的评价不同浓度氯普鲁卡因对人胚胎肾细胞(HEK2936细胞)KCNQ2/Q3通道电流的影响。方法以HEK293细胞作为表达体系,用脂质体交KCNQ2/3钾离子通道基因和绿色荧光蛋白转染至HEK293细胞,使细胞表达KCNQ2/Q3通道。第一部分:采用随机数字表法,将转染后的HEK293细胞分为4组(n=11):对照组、1、10和100mmol/

2、L氯普鲁卡因组,记录不同钳制电压(一40、0、40mv)下HEK293细胞KCNQ2/Q3通道电流,作用时间为1rain。第二部分:采用随机数字表法,将转染后的HEK293细胞分为2组(n=5):对照组(c组)和10mmol/l氯普鲁卡因组(L组),记录不同钳制电压(一80~30mv)下HEK293细胞KCNQ2/Q3通道电流,作用时问为1rain。采用单指数方程对通道激活段和去活段进行拟合,计算KCNQ2/Q3通道激活时间常数和去活时间常数。不同激活电压’F所获去活尾电流统一标准化后经Bohzmann方程拟合,得到KCNQ2/Q3通道电流一激活电压关系曲线(即通道I—v曲线)、结果第

3、一部分:钳制电压一40、0和40mV时,1、1O和100mmol/L氯普鲁卡因组HEK293细胞KCNQ2/Q3通道电流抑制率高于对照组(P<0.05或0.01)。第二部分:与对照组比较,钳制电压0mv时10mmol/L氯普鲁卡因组KCNQ2/Q3通道激活时间常数延长,钳制电压一80mV时Kc—NQ2/Q3通道去活时间常数缩短,KCNQ2/Q3通道半数激活电压升高,向去极化移动,I—v曲线斜率减小(P<0.05)。结论氯普鲁卡因呈浓度依赖性抑制HEK2936细胞KCNQ2/Q3通道电流;氯普鲁卡因可延迟KCNQ2/Q3通道开放,提前关闭,使KCNQ2/Q3通道活性降低。【关键词】KCN

4、Q2钾通道;KCNQ3钾通道;麻醉药,局部;药物毒性EfectsofdiferentconcentrationsofchloroprocaineonKCNQ2/Q3channelcurrentsinHEK2936cellsQ1NShi4i,,J,Jun,LIHong,LIMing,ZHANGFan,ZHAOSen—ming,CHENGYah—xin.DepartmentofOsteology,ThirdAffiliatedHospitalofHebeiMedicalUniversity,Shifiazhuang050051,ChinaCormspondingauthor:CHENGYa

5、h—xin,Departmento,‘Pain,ThirdAffiliatedHospitalofHebeiMedicalUniversi—ty,Shijiazhuang050051,China,Email:yanxincheng@12,.corn【Abstract】ObjectiveToevaluatetheefectsofdifferentconcentrationsofehloroproeaineonKCNQ2/Q3channelcurrentsinHEK2936cells.MethodsHumanembryonickidney(HEK293)cellsservedasanexp

6、ressionsystem.KCNQ2andKCNQ3cDNAsandgreenfluorescentproteinweretransfectedintoHEK293cellsbyusingli—pofeetamine.TheKCNQ2/Q3currentswererecordedbyusingthewhole-cellpatch—clamptechnique.PartiThetransfectedHEK293cellswererandomlydividedinto4groups(n=11each):controlgroup,and1,10and100mmol/Iehloroproca

7、inegroups.TheKCNQ2/Q3channelcurrentsproducedbydifferentconcentrationsofchloropro—cainewererecorde(iunderdifierentholdingpotentials(一40,0an(140mV)andtheactiontimewas1min.Part【IThetransfectedHEK293cellswererandomlydividedinto2

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