EGCG对人肝癌细胞的抑制作用及其可能的机制-论文.pdf

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1、中国肿瘤生物治疗杂志http://www.biother.orgChinJCancerBiother,Feb.2014,Vo1.21,No.1·38··基础研究·doi:10.3872/j.issn.1007-385X.2014.O1.007EGCG对人肝癌细胞的抑制作用及其可能的机制张勇,沈筱芸,冯雁,谢裕安,张力图,利基林,罗小玲(广西医科大学附属肿瘤医院实验研究部,广西南宁530021)[摘要]目的:观察表没食子儿茶素没食子酸酯[(-)一epigallocatechin一3一gallate,EGCG]对体外培养的人肝癌细胞株生物学特性的影

2、响,研究其作用效果与血红素氧合酶一1(hemeoxygenase一1,H0—1)及相关信号分子的关系,探讨其作用机制。方法:利用MTr法检测EGCG对HepG2、Sk—hepl、SMMC7721等肝癌细胞增殖的影响,并用吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)双染法观察肝癌细胞的形态学变化,流式细胞术检测EGCG作用后Sk—hepl细胞周期的变化,Real—timePCR和Westernblotting法检测EGCG作用后Sk—hepl细胞中HO一1、IL一10及TNF—等信号分子表达的变化。结果:EGCG作用后,3株肝癌细胞贴壁细胞数量显著少于对照组,

3、凋亡细胞数增多[HepG2:(16.33±3.51)us(3.67±1.15)个,P<0.01),Sk—hepl:(18.33±2.31)vs(2.33±2.08)个,P<0.01),SMMC7721:(15.33±3.06)us(3.33±2.08)个,P<0.O1)]。实验组Sk—hepl细胞G2/M期比例明显高于对照组[(34.33±8.09)%(3.07±2.32)%,P<0.01]。设对照组基准值为1.00,实验组Sk—hepl细胞中HO一1、IL一10、及TNF.ot的mRNA相对表达水平依次为(0.58±0.15)、(5.91±1

4、.11)、(5.29±1.14),差别均有统计学意义(P<0.01);与对照组相比,实验组HO一1蛋白表达水平明显下调(0.16±0.04us0.33±0.08,P<0.05),IL一10(0.42±0.06'us0.24±0.08,P=0.034,P<0.05)和TNF.蛋白(0.95±0.17vs0.58±0.08,P<0.05)表达水平明显上调。结论:EGCG可抑制肝癌细胞增殖及诱导细胞凋亡,并将Sk—hepl细胞阻滞在G/M期,其机制可能与HO一1、IL一10、TNF一0l等炎症信号分子表达的变化有关。[关键词]没食子儿茶素没食子酸酯;

5、肝癌细胞;血红素氧合酶一1[中图分类号]R735.7;R730.5[文献标志码]A[文章编号]1007—385X(2014)01-00384)6Epigallocatechin-3--gallate·—inducedgrowthinhibitionandtheunderlyingmecha-nismsinhumanhepat0ce儿ularcarcinomacellsZhangYong,ShenXiaoyun,FengYah,XieYu’an,ZhangLitu,LiJilin,LuoXiaoling(DepartmentofResearch,

6、Affili—atedCancerHospitalofGuangxiMedicalUniversity,Nanning530021,Guangxi,China)【Abstract]Objective:ToinvestigatetheefectofEpiga11ocatechin一3一gallate(EGCG)onhepatocellularcarcinomacellgrowthandthemolecularmechanismsunderlyingtheeffeetvitro.Methods:Threehumanhepatocellularcar

7、cinomacelllines(i.e.,HepG2,Sk—heplandSMMC7721)wereusedinthisstudy.Cellswereculturedinthepresenceof0,40,80or120g/mlEGCG.At24,48and72hafterEGCGtreatment,cellviabilitywasassessedbyMTFassay,apoptosisbyAO/EBstaining,cellcycleprogressionbyflowcytometer,andmRNAandproteinlevelsofHO1

8、1,IL一10andTNF—otbyReahimePCRandWesternblottingrespectively.Results:EGCGtrea

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