BH3-only成员参与辐射诱导的小鼠肝细胞凋亡-论文.pdf

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1、第二军医大学学报2014年8月第35卷第8期http://www.ajsmmu.eftAcademicJournalofSecondMilitaryMedicalUniversity,Aug.2014,Voi.35,No.8·837·DOI:10.3724/SP.J.1008.2014.00837·论著·BH3-only成员参与辐射诱导的小鼠JK.~[tt胞凋亡陈松,冯旭,邹赢锌,栾洁,张术,周意,储智勇海军医学研究所防护医学研究室,上海200433[摘要]目的研究细胞凋亡及凋亡相关基因的表达在急性肝脏辐射损伤中的作用。方法采用BAIB/c小鼠以c

2、o7射线进行全身照射,建立急性肝脏辐射损伤动物模型,光镜和电镜观察病变48h。然后采用蛋白质印迹分析法检测肝组织中Caspase3、Caspase8、Bcl一2、Bcl—xL、Bax、Bad、PUMA和Slug蛋白表达,并采用原位末端标记法(TUNEL染色)检测细胞凋亡。结果辐照后4h出现肝细胞变性和凋亡,辐照后12h出现细胞坏死,辐照后24~48h肝细胞凋亡达到峰值并检测到Caspase3激活;Bcl一2在辐照后4~24h上调,于辐照后48h回落;PUMA在辐照后4~48h上调;Bcl—x、Bad在辐照后6~48h上调;Bax、Slug仅在辐照后

3、12h上调。结论辐射诱导的PUMA、Bad表达上调与辐辐照后肝细胞凋亡增加有关。[关键词]肝;辐射损伤;细胞凋亡;依赖p53上调的凋亡调节子;Bad[中图分类号]R818.85[文献标志码]A[文章编号]0258—879X(2014)08—0837—05BH3-‘onlymembersareinvolvedinradiation-inducedapoptosisinmouseliverCHENSong,FENGXu,ZOUYing—xin,LUANJie,ZHANGShu,ZHOUYi,CHUZhi—yongDepartmentofRadiolog

4、icalProtection,NavalMedicalResearchInstitute,Shanghai200433,China[Abstract]ObjectiveTostudytheexpressionofapoptosis—associatedgenesandtheroleofapoptosisinacuteradiation-inducedliverinjury.MethodsAmouseradiationmodel,whichwasirradiatedwith。Coray,wasestablishedinthisstudy,andthe

5、pathologicalchangeswereobservedbylightandelectronmicroscopyfor48hours.Westernblottinganalysiswasusedtomeasuretheexpressionofsomeproteins(Caspase3,Caspase8,Bcl一2,Bcl-xL,Bax,Bad,PUMA,Slug)andTUNELassaywasemployedtoexaminecellapoptosisinmouseliver.ResultsDegenerationandapoptosisw

6、erefoundintheliverat4hafterirradiationandnecrosisoccurredat12hafterirradiation.ThepeakofapoptosiswithactivationofCaspase3inliverwasdetectedduring24—48hafterirradiation.Bcl一2proteinexpressionwasup—regulatedduring4-24hafterirradiation,thenwasdown—regulatedat48h;PUMAproteinwasup—

7、regulatedduring4-48hafterirradiation;Bcl—xLandBadproteinwereup—regulatedduring6-48hafterirradiation;andBaxandSlugproteinwereup—regulatedonlyat12hafterirradiation.ConclusionUp—regulationofBH3一onlymembers(PUMAandBad)afterirradiationmaybeassociatedwiththeincreaseofapoptoticcellsi

8、nthe1iver.[-Keywords]liver;radiationinjuries;apoptom‘s;p53up—

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