酶的基本性质实验.doc

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1、专业：姓名：学号：日期：地点：装订线实验报告课程名称：生物化学实验（甲）指导老师：成绩：__________________同组学生姓名：一、实验目的和要求（必填）二、实验内容和原理（必填）三、实验材料与试剂（必填）四、实验器材与仪器（必填）五、操作方法和实验步骤（必填）六、实验数据记录和处理七、实验结果与分析（必填）八、讨论、心得酶的基本性质实验A、底物专一性一、实验目的和要求：1.了解酶的专一性；2.掌握验证酶的专一性的基本原理及方法；3.学会排除干扰因素，设计酶学实验。二、实验内容和原理：酶催化作

2、用的一个重要特点是具有高度的底物专一性，即一种酶只能对某一种底物或一类底物起催化作用，对其他底物无催化反应。↗相对专一性酶的专一性→绝对专一性↘立体异构专一性本实验以唾液淀粉酶、蔗糖酶对淀粉、蔗糖水解反应的催化作用来观察酶的专一性。采用Benedict试剂检测反应产物。Benedict试剂是碱性硫酸铜溶液，具有一定的氧化能力，能与还原性糖的半缩醛羟基发生氧化还原反应，生成砖红色氧化亚铜沉淀。Na2CO3+2H2O→2NaOH+H2CO3CuSO4+2NaOH→Cu(OH)2+Na2SO4还原糖(—CHO

3、or—C=O)+2Cu(OH)2→Cu2O↓+2H2O+糖的氧化产物↓↓↓醛基酮基砖红色或红色在分子结构上，淀粉几乎没有，而蔗糖全无半缩醛基，它们均无还原性，因此它们与Benedict试剂无呈色反应。淀粉被淀粉酶水解，产物为葡萄糖；蔗糖被蔗糖酶水解，其产物为果糖和葡萄糖，它们都为具有自由半缩醛羟基的还原糖，与Benedict试剂共热，即产生红棕色Cu2O沉淀。本实验以此颜色反应观察淀粉酶、蔗糖酶对淀粉和蔗糖的水解作用。一、实验材料与试剂：1、实验材料⑴蔗糖酶液(样品Ⅳ1：10稀释）;⑵新鲜唾液（含唾液淀

4、粉酶）。2、实验试剂⑴蔗糖酶液(样品Ⅳ1：10稀释）；⑵唾液淀粉酶液（唾液1：200稀释）⑶5%蔗糖（A.R.）溶液；⑷0.5%淀粉溶液（含0.3%NaCl）；⑸Benedict试剂。二、实验器材与仪器：1.漏斗；2.脱脂棉花；3.恒温水浴（37℃，100℃）；4.量筒；5.试管及试管架；6.烧杯；7.吸量管。三、操作方法和实验步骤：往1，2，3试管中分别加入蒸馏水、5%蔗糖溶液、0.5%淀粉（0.3%NaCl）溶液3ml㈠检查试剂往三支试管中各加入Benedict试剂2ml取三支试管，编号1，2，3将

5、三支试管摇匀，置于沸水浴中煮沸2~3min记录观察结果（二）淀粉专一性往1，2，3试管中分别加入蒸馏水、5%蔗糖溶液、0.5%淀粉（0.3%NaCl）溶液3ml往1，2，3试管中各加入唾液淀粉酶液1ml取三支试管，编号1，2，3将三支试管摇匀，置于沸水浴中煮沸2~3min往三支试管中各加入Benedict试剂2ml摇匀，置于37℃水浴中保温10min记录观察结果往1，2，3试管中分别加入蒸馏水、5%蔗糖溶液、0.5%淀粉（0.3%NaCl）溶液3ml（三）蔗糖酶的专一性往1，2，3试管中各加入蔗糖酶液1

6、ml取三支试管，编号1，2，3将三支试管摇匀，置于沸水浴中煮沸2~3min往三支试管中各加入Benedict试剂2ml摇匀，置于37℃水浴中保温10min记录观察结果一、实验结果与分析：（一）检查试剂：试剂处理试管编号1230.5%淀粉（0.3%NaCl）溶液（ml）35%蔗糖溶液（ml）3蒸馏水（ml）3Benedict试剂（ml）222摇匀，沸水浴2~3分钟记录观察结果（二）淀粉酶专一性：试剂处理试管编号1230.5%淀粉溶液（ml）35%蔗糖溶液（ml）3蒸馏水（ml）3唾液淀粉酶溶液（ml）11

7、1摇匀，37℃水浴10分钟Benedict试剂（ml）222摇匀，沸水浴2~3分钟记录观察结果（三）蔗糖酶专一性：试剂处理试管编号1230.5%淀粉（0.3%NaCl）溶液（ml）35%蔗糖溶液（ml）3蒸馏水（ml）3蔗糖酶溶液（ml）111摇匀，37℃水浴10分钟Benedict试剂（ml）222摇匀，沸水浴2~3分钟记录观察结果七、讨论、心得：1、设计第一组实验的目的是为了检测是否存在干扰因素；第二组实验是为了验证淀粉酶的底物专一性；第三组实验是为了验证蔗糖酶的底物专一性。2、三组实验中的蒸馏水都

8、是作为对照用的。3、淀粉溶液中0.3%NaCl的作用是为了保证淀粉酶的活性，同时氯离子作为激活剂，可以增加酶的活性，使反应现象更加明显。4、试管要洁净，所有试剂加量要准确，加好试剂后要摇匀。使用试剂时不要人为造成试剂间的互相污染；试剂用好瓶盖要立即盖好，防止试剂间的互相污染。以免实验结果的错误。B、影响酶活性的因素——激活剂、抑制剂一、实验目的和要求：1.了解激活剂和抑制剂对酶促反应速度的影响；2.学习检定激活剂和抑制剂影响酶促反应速度的原