Heparanase对肝癌细胞生物学行为的影响-论文.pdf

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1、第23卷第29期China中Jo国ur现na代lo医fM学od杂er志nMedicineVoI．23No．292013年1O月0ct．2013文章编号：1005—8982(2013)29—0036—05·论著·Heparanase对肝癌细胞生物学行为的影响梁天成，付文广，雷正明(1．四川省泸州市中医医院外一科，四川泸州646000；2．泸州医学院附属医院肝胆胰外科，四川泸州646000)摘要：目的探讨乙酰肝素酶(Heparanase)对肝癌细胞生物学功能的影响。方法利用荧光定量PCR检测人肝癌细胞HepG2、Huh一7、Bel一7402、MHCC一97H以及SMMC一7

2、721中Heparanase的表达水平；设计及合成3条Heparanase特异性小分子干扰RNA(siRNA)并用于转染Heparanase表达高的一株人肝癌细胞，通过荧光定量PCR和Westernblotting检验干扰效率；MTT法检测细胞增殖能力；Transwell小室法检测细胞的侵袭能力；ArmexinV／PI染色法检测细胞凋亡。结果MHCC一97H细胞中的Heparanase表达水平显著高于其余4株肝癌细胞(P<0．05)；siRNA3能瞬时下调肝癌细胞的Heparanase水平；siRNA介导的Heparanase基因沉默使肝癌细胞的增殖速度放慢，侵袭能力减

3、弱，凋亡率升高，差异具有统计学意义(P

4、ouTraditionalChineseMedicineHospital,Luzhou，Sichuan64600,P．R．China；2．DepartmentofHepatobiliarySurgery,theAffiliatedHospital，LuzhouMedicalCollege，Luzhou，Siehuan646000,P．R．China)Abstract：【Objective】Todeterminewhethersilencingofheparanaseexpressioncanabolishthemalig—nantcharacteristicsofhep

5、atocellularcarcinomacells．【Methods】Heparanaseexpressionlevelsoffivehepato—cellularcarcinomacelllinesweremeasuredbyreal-timePCR．Threeheparanase—specificsmallinterferingRNA(siRNAs)weredesigned，synthesized，andtransfeetedintoculturedhepatocellularcarcinomacelllineMHCC-97H．Heparanaseexpressio

6、nwasmeasuredbyreal-timequantitativePCRandwesternblotting．CellproliferationwasdetectedbyMTFcolorimetry．Theinvitrocellinvasionwasdetectedbymatrigelinvasionas—say．Thecellapoptoticratewasanalyzedbyusingflowcytometry．【Results】TransfectionofsiRNAresultedinreducedexpressionofheparanase．ThesiRNA

7、-mediatedsilencingofheparanasesuppressedthecellularproliferationandinvasionofhepatocellularcarcinomacells．Inaddition，cellapoptosisratesweresignificantlyincreasedafterknock—downofheparanase．【Conclusion】Theseresultsdemonstratedthatgenesilencingofheparanasecaneficientlyaboli