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1、专题3第1课菊花的组织培养学案学习目标 1.了解植物组织培养技术在生产中的应用和MS固体培养基的配方。2.熟悉植物组织培养的基本过程和影响植物组织培养的因素。3.理解细胞分化的概念及离体植物细胞的脱分化和再分化。 一、基础知识1.植物组织培养的基本过程(1)细胞全能性的表达:________的植物组织或细胞,在一定的____________、________和________________的作用下,发育成完整植株的过程。(2)细胞分化:在植物的________过程中,细胞在________、________和____________上都会出现_______

2、_的差异,形成这些差异的过程叫做细胞分化。(3)植物组织培养的基本过程离体的植物器官、组织或细胞(又叫________)愈伤组织胚状体、丛芽等新个体①愈伤组织的特点:细胞________________,是一群________________的呈________________的薄壁细胞。②脱分化(去分化):由____________的植物组织或细胞产生____________的过程。③再分化:由________________________重新分化成根或芽等器官的过程。(4)条件:________的植物组织或细胞,在一定的________、_______

3、_和其他外界条件的作用下就可能表现出全能性,发育成完整植株。离体的植物组织或细胞叫做________。2.影响植物组织培养的因素(1)培养材料的影响:不同的植物组织,培养的难易程度____________。对于同一种植物材料,材料的________、________________等也会影响实验结果。因此菊花的组织培养,一般选择________________的茎________部________的侧枝。(2)营养物质的影响:常用的________培养基,主要成分包括____________、____________、________以及蔗糖等。其中____

4、________和____________提供植物细胞所必需的无机盐;________提供碳源,维持细胞渗透压。(3)植物激素的影响:MS培养基常需添加植物激素。其中________和____________是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素,这两种激素的________、________________以及____________等,都会影响实验结果。下表是关于两种植物激素在组织培养过程中的作用。使用顺序或用量比实验结果先使用生长素,后使用细胞分裂素有利于__________,但细胞________先使用细胞分裂素,后使用生长素细胞________

5、____同时使用分化频率____生长素用量/细胞分裂素用量,比值高有利于____的分化、抑制____的形成生长素用量/细胞分裂素用量,比值低有利于____的分化、抑制____的形成生长素用量/细胞分裂素用量,比值适中促进________的形成(4)环境因素的影响:________、________、________等条件也能影响植物组织培养。二、植物组织培养的操作流程1.制备MS固体培养基:将各种营养成分按比例配制成________________。利用母液配制菊花组织培养所需要的培养基,菊花的组织培养比较容易,因此可以不加激素,而如果是其他植物的组织培养,

6、则要配制成三种培养基,即____________、________________和________________。配制菊花的组织培养的培养基时先将称好的琼脂加入800mL蒸馏水中,加热使________熔化;然后加入______________30g,加入一定量的________,充分混匀后加蒸馏水定容至1000mL,调节________;最后分装到锥形瓶中,每瓶分装50mL或100mL。用包在纱布中的棉塞封严瓶口,外面包一层牛皮纸。将配制好的培养基放入________________锅,在121℃下灭菌15min。2.外植物体消毒:选取生长旺盛的菊花的

7、嫩枝,先用清水洗净,再用体积分数为________________浸泡6~7s后,立即取出并用无菌水清洗,取出后吸干水分再放入质量分数为________________中浸泡1~2min。取出后,在无菌水中至少清洗3次,漂净消毒液。3.接种:在超净工作台上铺上无菌滤纸,将已消毒的菊花茎段切成小段(长0.5~1.0cm),迅速接种到培养基上。插入时应注意方向,使嫩茎的形态学下端接触培养基,不要________。每瓶接种6~8块嫩茎。接种后,将锥形瓶的瓶口在酒精灯火焰上转动灼烧一遍,将封口膜重新扎好,贴上标签,做好记录。4.培养:接种后的锥形瓶放在_______

8、___中培养。培养温度应控制在18~22℃,并且每日

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