外周血单核细胞中HBVcccDNA检测的意义及进展-论文.pdf

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1、蔡少平，等．外周血单核细胞中HBVcccDNA检测的意义及进展819外周血单核细胞中HBVcccDNA检测的意义及进展蔡少平，刘泽，徐东平(1解放军医学院，北京100854；2解放军302医院军人肝病诊疗中心，北京100039)摘要：HBV在复制过程中存在着共价闭合环状DNA(cccDNAJ形式，cccDNA是HBV复制的原始模板，是HBV持续感染的主要原因，也是HBV一个重要生物活性指标。HBV是嗜肝病毒，但可能存在肝外感染，有研究表明，外周血单核细胞(PBMC)中可以检测到HBVcccDNA。归纳

2、了PBMC中HBVcccDNA在乙型肝炎患者肝移植术后及抗病毒治疗后HBV复发、HBV母婴传播中的预测作用，以及其参与HBV肝外感染的可能机制。由此可见，PBMCHBVcccDNA在HBV的治疗及研究中有重要意义。关键词：肝炎病毒，乙型；DNA，环状；单核细胞中图分类号：R512．62文献标志码：A文章编号：1001—5256(2014)08—0819—03SignificanceandprogressindetectionofHBVcccDNAinperipheralbloodmononuclear

3、cellsCAIShaoping，LIUZe，XUDongping．(ChinesePLAMedicalSchool，Beng100854，China)Abstract：HepatitisBvirus(HBV)eovalentlyclosedcircularDNA(cccDNA)isanintermediatereplicativeepisomewhichisstableandnoteasytoeliminate．ceeDNAservesasthetemplateforHBVreplicationan

4、dplaysanimportantroleinpersistenceofHBVinfectioninhep—atocytes，anditisalsoabiomarkerofHBVactivity．StudiessuggestedthatHBVhasextrahepaticinfectivityandcccDNAcouldbedetectedinperipheralbloodmononuclearcells(PBMC)．ThepredictivevaluesofHBVcccDNAinPBMCforHBV

5、recurrenceafterlivertransplanta’tionandantiviraltherapyandmother—to—childtransmissionofHBVinpatientswithhepatitisB，aswellasthepossiblemechanismofeccDNAinvolvedinextrahepatieHBVinfection，aresummarized．Therefore，thedetectionofHBVcccDNAisofgreatsignificanc

6、eforthestudyandtreatmentofHBV．Keywords：hepatitisBvirus；DNA，circular；monocytes据世界卫生组织报道，全球约有20亿人曾感染过HBV，成-41。HBVcccDNA存在及数量标志着HBV的复制和复制其中3．5亿人为慢性HBV感染者，每年约有100万人死于的活跃程度，HBVcccDNA的检测在HBV清除机制研究、抗HBV感染所致的肝衰竭、肝硬化和原发性肝细胞癌J。HBV药物作用机制及药效学研究、对乙型肝炎患者病情变化HBV属于嗜肝DN

7、A病毒，其基因组为双链松弛环状DNA的监测均有重要的应用价值。(relaxedcircularDNA，rcDNA)，分子中2条链均是不闭合的。1HBVcccDNA的检测方法负链含有HBV基因组的全长基因，在5起始端与3末端之间由于HBVcccDNA在结构和生物学方面的特殊性，其特异有一缺刻(nick)；正链长度可变，3末端不固定，约为负链长度性检测一直存在争议，主要是因为各个实验室在检测技术方法的50％～100％，与5端有较大缺口(gap)。HBV进入肝细胞上存在差异。HBVcccDNA检测方法的特异

8、度和灵敏度还存后，病毒核心颗粒进入细胞核，2条链的缺口均被补齐，形成共在不足，不能完全排除假阳性和假阴性结果。目前对HBV价闭合环状DNA(eovalentlyclosedcircularDNA，cccDNA)，是cccDNA的检测主要采用ATP依赖DNA酶(plasmid—safeATPHBV复制的原始模板，以cccDNA为模板形成前基因组RNA—dependentDNase，PSAD)消化+跨缺口PCR法，该方法是基(pregenomicRNA，pg