益气复脉合剂抗心律失常作用机制研究.doc

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1、益气复脉合剂抗心律失常作用机制研究  摘要:目的利用膜片钳技术阐述益气复脉合剂抗心律失常作用机制。方法采用胶原酶法急性分离大鼠左心室肌细胞,利用膜片钳技术,记录心室肌细胞动作电位。结果异丙肾上腺素灌流前,中药组动作电位时程、APD50、APD90较空白对照组明显延长;Iso灌流后,空白对照组与中药组APD较灌流前显著延长,空白对照组APD50、APD90较灌流前亦显著延长;给Iso后,中药组APD、APD50、APD90较空白对照组显著缩短。结论益气复脉合剂可以缩短Iso引起的APD的延长,可能与抑制平台期Ca

2、2+电流和复极后期K+电流有关。  关键词:心律失常;益气复脉合剂;动作电位;膜片钳;异丙肾上腺素  中图分类号:R541.7R289.5文献标识码:A  Abstract:ObjectiveToinvestigatetheanti-arrhythmicmechanismswithYiqiFumaimixturebythepatch-clamptechnique.MethodsUsingthecollagenasemethodinacutelyisolatedratleftventricularmyocytes

3、,andusingpatchclamptechique,torecordtheactionpotentialofventricularmyocytes.ResultsBeforeisoprenalineperfusion,comparedwiththecontrolgroup,theChinesemedicinegroupcouldsignificantlyextendactionpotentialduration,APD50andAPD90.AfterIsoperfusion,thecontrolgroupa

4、ndtheCMgroupcouldsignificantlyextendAPD,andthecontrolgroupalsocouldsignificantlyextendAPD50andAPD90.AfterIsoperfusion,comparedwiththecontrolgroup,theCMgroupcouldsignificantlyshorteningAPD,APD50andAPD90.ConclusionItsuggeststhatYFMcanagainsttheprolongationofAP

5、DcausedbyIso,mayberelatedtotheinhibitonofthelateplateauCa2+currentandrepolarizationK+current.  Keywords:arrhythmia;YiqiFumaimixture;actionpotential;patchclamp;isoprenaline  心肌细胞的工作基础取决于心肌细胞膜的跨膜离子流,多种跨膜离子流的复杂变化产生心肌细胞的动作电位和静息电位,即动作电位和静息电位是多种离子通道综合作用的结果[1,2]。既往

6、研究中发现益气复脉合剂具有抗室性心律失常作用[3]。中药益气复脉合剂在整体实验研究中已显示其抗心律失常作用,因此本实验就其抗心律失常作用机制进行初步探讨。  1材料与方法  1.1材料  1.1.1实验动物清洁级健康雄性SD大鼠,体重200g±20g,购自北京华康生物科技股份有限公司,许可证编号:SCXK2009-0007。  1.1.2实验仪器与药物渗透压仪Fiske210;DMI-UniversalPuller拉制仪;膜片钳放大器EPC10;微操MP-225;显微镜IX71;微电极B15014F;pH剂PB

7、-21;纯水机Elix、抽滤泵及滤膜;恒温水浴锅;BT100-2J蠕动泵。  益气复脉合剂,药物终浓度4.13g/mL。异丙肾上腺素、二甲基亚砜和牛血清白蛋白购自Sigma公司;Collagenasetype2购自Washington公司,其余试剂药物购自Alfa公司。  1.1.3主要溶液配制无钙台氏液:NaCl140.0mmol/L,KCl5.4mmol/L,MgCl21.0mmol/L,HEPEs10.0mmol/L,D-Glucose10.0mmol/L,NaOH调至pH7.4;有钙台式液:在无钙台式液

8、基础上加1.8mmol/LCaCl2;KB液:KOH80.0mmol/L,KCl40.0mmol/L,KH2PO425.0mmol/L,MgSO43.0mmol/L,L-Glutamic50.0mmol/L,Taurine20.0mmol/L,EGTA1.0mmol/L,D-Glucose10.0mmol/L,KOH调节至pH7.2;消化液:含60%Collagenasetype2+2

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