繁殖障碍母猪与健康母猪猪瘟抗体水平比较与分析.pdf

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1、·26·《上海畜牧兽医通讯》2011年第5期繁殖障碍母猪与健康母猪猪瘟抗体水平比较与分析杨小燕。戴爱玲。李晓华黄思琼。(1龙岩学院生命科学学院2预防兽医学与生物技术重点实验室3福建省人畜寄生与病毒性疫病防控工程技术研究中心福建龙岩364000)随着养猪业集约化和规模化发展，猪病的防治难度在不1．3猪瘟病毒抗体检测断增大，尤其是猪繁殖障碍性疾病的发生，严重制约着规模猪瘟病毒抗体检测方法按试剂盒操作说明书进行。化养猪业的健康发展。繁殖障碍性疾病主要特点是引起母1．4猪瘟抗原检测猪不育或受胎率低，妊娠母猪流产、早产，产死胎、木乃伊胎1．4．1ELISA方法：猪

2、瘟病毒抗原检测方法按试剂盒操作和弱仔，或者有些母猪出现哺乳性能低、出生小猪拉稀等症说明书进行。状。母猪繁殖障碍的病因很多，有传染性和非传染性，传染1．4．2RT_PCR方法：根据GenBank上发表的CSFVE2基性的如猪瘟、猪伪狂犬病、猪繁殖与呼吸综合征、猪细小病毒因，扩增长度CSFV为288bp，引物由上海生工合成。引物的病、日本乙型脑炎、猪圆环病毒病、衣原体、布氏杆菌病等。序列如下：CSFV上游引物：5"-caggtatgcgatctcgtcaacca一3；下非传染性因素如营养、环境、霉菌毒素、药物和管理等，其临游引物：5-gggcacagccca

3、aatccgaagt一3。全血中病毒RNA的床症状和病理变化表现复杂，临床上难以鉴别。特别是由病提取参照TRIZOLRNA提取试剂说明书进行；csFVcDNA原性的传染性因素引起的繁殖障碍存在严重的混合感染现的合成采用2Ol反转录体系，反转录引物利用随机弓l物。象。陆文俊等“运用了PCR和RT—PCR技术对广西12个具体方法参照TaKaRa公司的M—MLV反转录酶系统说明种猪场113份母猪流产病料进行CSFV、PRRSV、PRV和书进行。以病毒cDNA为模板进行PCR扩增。反应体系为PPV检测调查，结果显示混合感染样品占总样品数的251，其中10×PCR

4、缓冲液(Mg2plus)2．5l，2．5mmol／I25．7，PRRSV+CSFV和CSFV+PPV混合感染最为严dNTP1．6l，10v．mol／LCSFV上下游引物0．8l，TaqDNA重。贾斌等也报道证实了混合感染的严重性。此外，引起聚合酶0．25l，CSFV模板适量，用灭菌水补足251。扩增程繁殖障碍病的猪瘟、猪伪狂犬病、猪繁殖与呼吸综合征、猪圆序为：94℃预变性5min，94℃1min，57℃1min，72℃环病毒病以及日粮中的霉菌毒素严重损害猪的免疫系统，引1min，30个循环，72℃延伸10min，用1．0琼脂糖凝胶电泳起免疫抑制。研究表明

5、受PRRSV感染的无特定病原(SPF)检查PCR产物。的猪接种猪瘟疫苗，猪瘟抗体水平明显低于无感染PRRSV1．5重新免疫试验的对照猪。。繁殖障碍母猪存在在猪场排毒、散毒的可能，对猪瘟抗体检测不合格的所有种猪，每头肌肉注射兔源在饲养管理上具有占栏、饲料及药费成本，以及出生猪死亡猪瘟弱毒脾淋苗2头份，30~40d后采血，分离血清，用同样或饲养中后期死亡等潜在的经济损失。所以对于繁殖障碍的方法再次检测猪瘟抗体。这种疾病，确诊需要进行实验室检验。在实际生产中，许多2结果与分析大型的规模化猪场都有定期的母猪淘汰计划，如果对每头母2．1不同胎次母猪猪瘟抗体检测结果

6、猪进行多病原的实验室检验，存在实际操作和成本核算的问表1不同胎次母猪猪瘟抗体检测结果(单位：份、)题，所以大部分猪场根据生产性能情况实行淘汰，这种方法无法对潜在感染繁殖障碍病的母猪进行淘汰。我们在研究和实施种猪场猪瘟净化时，发现了一个有趣的现象，就是繁殖障碍母猪和健康母猪的猪瘟抗体水平存在很大的差异。为此，笔者对某存栏l200头能繁母猪的猪场进行猪瘟抗体检测，按胎次和母猪是否出现繁殖障碍对被检母猪进行分类，对繁殖障碍母猪与健康母猪猪瘟抗体水平进行比较与分析。1材料与方法1．1主要试剂与仪器HerdChek猪瘟抗体ELISA检测试剂盒和猪瘟抗原检测试剂盒购

7、自(美国IDEXX公司)北京爱德士生物科技有限从表1可以看出，1～2胎猪瘟抗体合格率略高，3～6胎公司。TaqDNA聚合酶、dNTPs、M—MLVReverseTran—猪瘟抗体合格率比较接近，7胎以上猪瘟抗体合格率明显降scriptase、DEPC(焦磷酸二乙酯)、DNA分子量标准(DL一低。母猪出现繁殖障碍症状也与胎次有一定的关系，第1胎2000Marker)均购自大连Takara宝生物工程有限公司；Tr—比较低，第2胎至第5胎繁殖障碍的比例有所上升，第6胎izolreagent购自Invitrogen公司。以上的母猪出现繁殖障碍的比例在30以上。酶

8、标仪：美国伯乐公司680。2．2健康母猪和繁殖障碍母猪猪瘟抗体检测结果1．2血清