感染马传染性贫血病毒的巨噬细胞差异表达蛋白质组分析.pdf

《感染马传染性贫血病毒的巨噬细胞差异表达蛋白质组分析.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、第34卷第12期中国预防兽医学报Vo1．34．No．122012年l2月ChineseJournalofPreventiveVeterinaryMedicineDec．2012doi：10．3969~．issn．1008-0589．2012．12．01感染马传染性贫血病毒的巨噬细胞差异表达蛋白质组分析刘海芳”，杜承，计，林跃智，王雪峰，周建华·(1．中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／大动物传染病研究室，黑龙江哈尔滨150001；2．东北农业大学动物医学院，黑龙江哈尔滨150030)摘要：为研究马传染性贫血病毒(EIAV

2、)感染其主要靶细胞马巨噬细胞(eMDM)后与细胞蛋白的相互作用，本研究采用EIAV强毒株EIAV感染48h后的马外周血单核细胞分化的eMDM，并以未感染eMDM为对照，提取细胞的蛋白质样品，进行双向凝胶电泳(2．DE)分离，并分析凝胶中差异蛋白点。结果共检测出19个表达差异的蛋白点(ratio>1．4，p<0．05)，其中感染组相对于对照组有7个蛋白质上调表达，12个蛋白质呈现下调表达。将差异蛋白进行串联质谱分析进行鉴定，并通过生物信息学方法对这19个差异表达蛋白进行了蛋白互作用分析。此外，对其中5个比较重要蛋白的mRNA水平进行了荧光定量P

3、CR分析，其表达变化与2-DE结果一致本研究为进一步分析EIAV与其宿主细胞eMDM的相互作用提供了参考。关键词：马传染性贫血病毒；eMDM；差异蛋白；双向电泳；生物信息学中图分类号：$852．65文献标识码：A文章编号：1008．0589(2012)12．0933．04DiferentialproteomeanalysisofequinemacrophagesinfectedwithequineinfectiousanemiavirusLIUHai-fang十，DUCheng，十，LINYue—zhi，WANGXue—feng，ZHOUJi

4、an—hua(1．DivisionofLivestockInfectiousDiseases，StateKeyLaboratoryofVeterinaryBiotechnology，HarbinVeterinaryResearchInstitute，ChineseAcademyofAgriculturalSciences，Harbin150001，China；2．CollegeofVeterinaryMedicine，NortheastAgriculturalVniversity，Harbin150030，China)Abstract：Toi

5、nvestigatetheinteractionbetweenequineinfectiousanemiavirus(EIAV)andthehostequinemonocyte-derivedmacrophages(eMDM)，thediferentiallyexpressedproteinsineMDMinfectedwithanEIAVpathogenicstrainEVDLwereanalyzedbyproteome．Totalproteinswereextractedfromcellsinfectedfor48hourandthedi

6、ferentiallyexpressedproteinswerescreenedbyusing2-Dacrylamidegelelectrophoresis．Cellextractsfrommock—infectedeMDMwereusedasthecontro1．Total19diferentiallyexpressedproteins(ratio>1．4，p<0．05)inEIAV—infectedeMDMwerefound，amongwhich7wereup-regulatedand12weredown—regulated．Allthe

7、se19diferentiallyexpressedproteinswereidentifiedbyexaminingwithtandemmassspectrum．Inaddition，theseproteinswereanalyzedforpossibleinteractionsusingseveralbioinformaticsmethods．ThemRNAlevelsoffivefunctionallyimportantdifferentiallyexpressedproteinswerefurtherconfirmedbyquanti

8、tativereal—timePCR．Thisstudyprovidedimportantinformationforfurtherinvestigationoft