骨髓间充质干细胞对LPS刺激BV2小胶质细胞炎症因子的影响.pdf

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1、实用医学杂志2014年第30卷第22期3545·基础研究·骨髓间充质干细胞对LPS刺激BV2小胶质细胞炎症因子的影响周小琳罗向阳何展文李栋方李平甘摘要目的：探讨大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)对LPS诱导BV2小胶质细胞炎症反应的影响。方法：采用贴壁分离法分离、纯化大鼠MSCs，BV2小胶质细胞进行常规培养传代。实验分为PBS对照组(A组)、PBS联合MSCs处理组(B组)、LPS刺激组(C组)、LPS联合MSCs干预组(D组)。BV2小胶质细胞接种于6孔板中培养过夜后，按上述实验分组处理．24h后收集各组培养上清液用于后续实验检测。显微镜下观察BV2小胶质细胞形态变化，Gri

2、ess法检测NO浓度，EusA法检测TNF．0l、IL．113的含量。结果：MSCs可以改善活415,~、胶质细胞的细胞形态；C组中LPS诱导小胶质细胞活化后，培养上清NO、II广1B、TNF．0【的含量明显上升(P<0．05)；D组中予MSCs处理后NO、IL-13、TNF一仅释放显著减少(P<0．05)。结论：MSCs明显降低活化小胶质细胞炎症因子的释放。其可能是通过抑制小胶质细胞炎症反应而发挥神经保护作用：本研究中MSCs通过非直接接触的方式作用于小胶质细胞，推测没有进入脑内的MSCs对活化小胶质细胞亦有抑制作用。关键词骨髓间充质干细胞；小胶质细胞；脂多糖；抗炎Efect

3、ofbonemarrowmesenchymalstemcellsoninflammatoryfactorsreleasedbyLPS·stimulatedBV·-2microgliaZHOUXiao—Lin，LUOXiang-Yang，HEZhan一n，，Dong-Fang，LIPing-Gan．Departmentofrics，TheMemorialHospitalofSunYat—selzUniversity，Guangzhou510120，ChinaCorrespondingauthor：LUOXiang-YangE—mail：luoxy33@hotmail．com【Ab

4、stract】ObjectiveToexploretheeffectofbonemalTOWmesenchymalstemcells(MSCs)onLPS—stimulatedBV2mierogliaininflammatoryreaction．MethodsMouseMSCswereisolatedandpurifiedbyadherencescreening．TheroutinelyculturedBV2mierogliainvitroweredividedintoPBScontrolgroup(groupA)，PBSplusMSCstreatmentgroup(group

5、B)，LPSstimulationgroup(groupC)andLPSplusMSCsgroup(groupD)．MSCsandBV2microgliawereculturedinthetranswellco—culturesystemfor24hours．WeobservedBV2microgliamorphologicalchangesunderthemicroscope，detectedtheconcentrationsofNObyGriessreaction，andthelevelofIL·1p，TNF·dbyELISA．ResultsMSCscanimproveth

6、emorphologyofactivatedmieroglia．TheconcentrationsofTNF—a，IL-113andNOinculturesupernatantswereincreasedsignificantly(尸<0．05)aftermicrogliaactivation，however，atthepresentofMSCs，theconcentrationoftheseinflammatoryfactorsdeclineddramaticly(尸<0．05)．ConclusionsMSCscansignificantlyinhibittheactivat

7、ionofmicroglia．Itmayplayaneuroprotectiveeffectbyreducingtheinflammationofmicroglia．MSCsshowinganti—inflammatoryefectsthrou【ghnon—directcontactwithnicroglial，suggestingthatMSCsoutsidethebrainmayalsoinhibittheactivationofmieroglia．【Keywords】Bonemesen