结核分枝杆菌抗体检测蛋白芯片的制备及应用.pdf

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1、生物技术通讯⋯LETYERSINBIOTECHNOLOGYVol.2⋯1N一o-.3j-M-ay.2010351doi:10.3969~.issn.1009-0002.2010.03.013研究报告结核分枝杆菌抗体检测蛋白芯片的制备及应用陈恺,付晓燕,刘琪琦。,王学军。,徐嘉良,陈苏红。,王升启。,郝素珍1.山西医科大学基础医学院微生物与免疫教研室,山西太原030001;2.江西农业大学动物科技学院,江西南昌330045;3.军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京100850;4.华南师范大学生命科学

2、学院,广东广州510631[摘要]目的:用重组结核分枝杆菌ESAT6、CFP10、M16和M38抗原制备相应的抗体检测蛋白芯片。方法:将制备的结核分枝杆菌抗原ESAT6、CFP10、M16和M38及购买的LAM抗原点于醛基化修饰的玻片上,制备成结核抗体检测蛋白芯片;使用该芯片对130例临床结核病患者和50例健康体检者血液样品进行检测,分析其敏感性和特异性,以及5项结核抗体的构成比。结果:结核杆菌抗体检测蛋白芯片的敏感性为90.8%(118/130),特异性为90%(45/50),LAM的检出率最高为91

3、.5%。结论:用ESAT6、CFP10、M16和M38及IJAM抗原制备的结核杆菌抗体检测蛋自芯片用于结核病辅助诊断的敏感性和特异性较高,可用于结核分枝杆菌抗体检测蛋白芯片试剂盒的开发。[关键词】结核分枝杆菌;抗体检测;蛋白芯片;重组抗原[中图分类号]Q78;R392.1[文献标识码]A[文章编号]1009—0002(2010)03—0351—04PreparationandApplicationoftheProteinChipofDetectingAnti—bodyofMycobacteriumtub

4、erculosisCHENKai,FUXiao—ran~,LIUQi—Qi3,WANGXu,e一n3,XUJia-Liang~,CHENSu-Ho噶WANGSheng-Qi3,HA0Su-Zhen1.DepartmentofMaerobiologyandImmunity,CollegeofBasicMedicine,ShanxiMedicalUniversity,Taiyuan030001;2.CollegeofAnimalScienceandTechnology,JiangxiAgrieutralUn

5、iversity,Nanchang330045;3.BeijingInstituteofRadiationMedicine,Beijing100850;4.CollegeofLifeSciences,SouthChinaNormalUniversity,Guangzhou510631:China[Abstract]Objective:TodevelopeproteinchiptestkitswhichcandetectantibodyofMycobacteriumtuberculo—swiththere

6、combinantESAT6,CFP10,M16andM38antigensoftuberculosis.Methods:TheproteinchipwaspreparedbyspottingESAT6,CFP10,M16,M38andLAMantigensonglassslides,andwasusedtodetect130bacillaryphthisisbloodserumsamplesand50bloodserumsamplesofhealthpeople.Thesensitivityspeci

7、ficityandconstituentratioofthefiveantibodieswereanalyzed.Results:Thesensitivityoftheproteinchipis90.8%(118/130)andthespecificityis90%(45/50),thedetectionrateofLAMis91.5%whichisthehighest.Conclusion:ThesensitivityandspecificityoftheproteinchippreparedbyES

8、AT6,CFPIO,M16,M38andLAMantigensarehigherinauxiliarydiagnosisofbacilaryphthisis,andcanbeusedtodevelopproteinchiptestkitsdetectinganti—bodyofM.tuberculosis.[Keywords]Mycobacteriumtuberculosis;antibody;detect;proteinchip;reco

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