抗人类免疫缺陷病毒抗体酶联免疫吸附法检测条件的优化.pdf

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1、·582·国际检验医学杂志2012年3月第33卷第5期ImJLabMed，March2012，Vo1．33，No．5[9]徐雷，明忠光．瑞氏一吉姆萨复合染色法在分泌物涂片中的应用价EJ3．实用医技杂志，2011，18(5)：503—504值EJ]．中国基层医药，2003，10(5)：480．ElO3孙学青，李志城，韩景银．血涂片细胞形态学检查及其临床应用(收稿日期：2011-12-09)·检验技术与方法·抗人类免疫缺陷病毒抗体酶联免疫吸附法检测条件的优化彭宽，李俊明，鞠北华(南昌大学第一附属医院检验科，江西南昌3300

2、06)摘要：目的探讨抗人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体酶联免疫吸附法检测条件的优化途径。方法比较不同离心和水浴条件下血清标本检测假阳性率。结果3000r／min离心3min和4000r／min离心5min获得的血清标本假阳性率分别为7．64‰和1．80％。，二者比较差异有统计学意义(P<0．05)。3000r／min离心3min获得的血清标本，经未水浴、37℃水浴30min、37℃水浴6Omin处理后，假阳性率依次降低(P

3、关键词：HIV；酶联免疫吸附测定；假阳性率BOI：10．3969／j．issn．1673—4130．2012．05．033文献标识码：A文章编号：1673-4130(2012)05—0582-02临床通常以酶联免疫吸附法(ELISA)检测抗人类免疫缺表2水浴条件对血清标本检测结果的影响陷病毒(HIV)抗体(HIV抗体)，且均以微孔板条为固相，一般涉及标本收集、保存、试剂准备、加样、温育、洗板、显色、比色和结果判断等步骤，任一步骤操作不当都有可能导致假阳性结果]。为实现不漏检HIV抗体阳性者，同时也对每位受检者负责，在检

4、测过程中需严格按标准程序进行操作，以确保初筛工作的质量]。笔者通过总结临床工作经验，分析了不同离心△：血清标本均经3000r／min离心3min后获得；：与未置水浴和水浴条件对ELISA检测HIV抗体的影响。组比较，P

5、珠生物有限公司(批号：120090420)；ELX-800酶标仪购自美国BioTek公司，DEM-3型全自动酶标洗板机购自严格按照《全国艾滋病检测技术规范》进行操作，可避免因操作不当造成的假阳性结果。标本因素则包括内源性(类风湿因北京拓普分析仪器有限责任公司，SH一2(A)酶标板脱水仪购自早稻田(北京)生物科技发展有限公司；KJ201A振荡器购自江子、补体、异嗜性抗体、自身抗体、溶菌酶等)和外源性(标本溶苏康健医疗用品有限公司，HFsafe一900生物安全柜购自利康血、标本被细菌污染、标本凝固不全、反复冻融等)干扰因生

6、物医疗科技控股有限公司。素_7]。厂商在研发试剂时，已考虑内源性因素对检测结果的1．3方法以干燥真空采血管采集患者外周静脉血标本，分影响，基本可避免内源性干扰因素对检测结果的影响[6]。就外别统计3000r／min离心3min和4000r／min离心5min条件源性干扰因素而言，本研究中检出的假阳性标本均无溶血、细下获得的血清标本检测结果，以及3000r／min离心3min条菌污染和反复冻融等情况。由于全血标本需18～24h才能完件下获得的血清标本未经水浴或不同条件下水浴后的检测结全凝固．，而本院从标本采集到分离血清开

7、始检测所耗时间较果。其他操作步骤参考《全国艾滋病检测技术规范》。假阳性短，全血标本基本上均为完全凝固，因此，笔者认为本研究中的的判断标准为初筛阳性，但复核试验阴性，或初筛及复核试验假阳性结果极有可能与标本凝固不全有关。标本凝固不全时，均为阳性，但确认试验为阴性。离心获得的血清标本中易残留纤维蛋白原成分，导致ELISA1．4统计学处理采用SPSS13．0软件进行完全随机设计两测定过程中在微孔中形成纤维蛋白凝块，进而导致假阳性结样本率的_)f检验，P<0．05为差异有统计学意义。果。因此，本科室结合实际情况，考虑通过适当改

8、变离心条件2结果(离心速度和时间)和水浴条件以避免假阳性结果的出现。不同试验条件下血清标本检测结果见表1～2。本研究显示，4000r／min离心5min和增加水浴时间均可表1离心条件对血清标本检测结果的影响有效降低假阳性率。适当增加水浴时间和改变离心条件_10]可促进全血标本充分凝固，有助于避免血清中残留纤维蛋白原，从而避免纤维蛋