实验 - 胞膜的渗透性.doc

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1、实验二细胞膜的渗透性[1]何为细胞膜?[2]为何不同物质进入细胞的速度不同?[3]何为溶血现象?[4]你知道有哪些血液抗凝剂?一、实验目的了解细胞膜[1]的渗透性及各类物质进入细胞的速度[2]二、实验原理1、在等渗溶液中,细胞对各种溶质的透过性不同。有的溶质可以进入,有的溶质不能渗入。2、渗入的溶质能提高细胞的渗透压,促进水分子进入细胞,引起溶血现象[3]。3、不同的溶质渗入到细胞内的速度不同,因此溶血时间也不同。三、实验材料新鲜血液(鸡血、猪血、牛血等)四、实验器材试管(1.5cmX18cm)、试管架、10ml移液管、1ml移液管、200ml烧杯(2个)、

2、250ml容量瓶、移液枪、胶头滴管、菜刀、吸球、电子天平、显微镜、盖玻片、载玻片、秒表五、实验药品及试剂0.17MNaCl、0.17MNH4Cl、0.17MNH4Ac、0.17MNaNO3、0.12MNa2SO4、0.12M草酸铵、0.32M葡萄糖、0.32M甘油、0.32M乙醇、0.32M丙酮、肝素抗凝剂[4]六、实验步骤1、制备血液稀释液(1)抗凝剂的制备:首先称取1克肝素钠粉末,然后加入0.17MNaCl溶液10ml(1∶10的比例),混合均匀,制成肝素抗凝剂。(2)血液稀释液的制备:取新鲜血液,按比例(肝素抗凝剂:血液=1∶10)混合均匀,配制成经肝

3、素抗凝的血[5]注意:这一步,动作要非常迅速,否则鸡血会凝固。或者先把抗凝剂加入到烧杯中,再加入新鲜的鸡血,边加边震荡即可。[6]为什么新鲜的鸡血会凝固?[7]为什么这一步要使用0.17M的NaCl溶液?液[5][6]。(1)按比例(经肝素抗凝的血液∶0.17MNaCl溶液=1∶10)混合均匀,形成一种不透明的红色液体[7]。1、低渗溶液(空白对照)的观察取试管一只,加入10ml蒸馏水,然后再加入1ml稀释的血液。注意观察溶液颜色的变化。结果是溶液由不透明的红色变为澄清。记录下这个过程所要的时间。2、红血球的渗透性按表一的配制,分别在下列十种等渗溶液中进行实

4、验。轻轻摇动,注意有无颜色变化,是否有溶血现象发生,记下时间(自加入稀释血液到溶液逐渐由红色变为透明澄清,红血球全部溶血所需时间),填入表一的空格中。3、显微观察(1)血液红细胞的观察滴一滴稀释的血液于载玻片上,盖上盖玻片。用光学显微镜观察细胞的种类、形状和颜色。(2)细胞破碎的观察在上一步的载玻片的一端滴加清水,在另一端吸水,并在显微镜下观察细胞的破裂。一、实验结果与分析1、比较和分析你所观察到的实验结果,并解释原因。结果:(1)在所提供的试剂中不溶血的有:(2)在所提供的试剂中不完全溶血的有:(3)在所提供的试剂中完全溶血的有:结果分析与比较:结论:1、

5、绘制你所观察到的血液细胞图。2、讨论溶血实验在研究中应用的可能性。附1:试剂配制表1、0.17MNaCl需要______克NaCl,定容至100ml。2、0.17MNH4Cl需要______克NH4Cl,定容至100ml。3、0.17MNH4Ac需要______克NH4Ac,定容至100ml。4、0.17MNaNO3需要______克NaNO3,定容至100ml。5、0.12MNa2SO4需要______克Na2SO4,定容至100ml。6、0.12M草酸铵需要______克草酸铵,定容至100ml。7、0.32M葡萄糖需要______克葡萄糖,定容至100

6、ml。8、0.32M甘油需要______克甘油(100%),定容至250ml。9、0.32M乙醇需要______克无水乙醇,定容至250ml。10、0.32M丙酮需要______克丙酮,定容至250ml。附2:表一在不同低渗溶液下溶血现象的调查编号试剂是否溶血时间110ml0.17MNaCl+1ml稀释的鸡血210ml0.17MNH4Cl+1ml稀释的鸡血310ml0.17MNH4Ac+1ml稀释的鸡血410ml0.17MNaNO3+1ml稀释的鸡血510ml0.12MNa2SO4+1ml稀释的鸡血610ml0.12M草酸铵+1ml稀释的鸡血710ml0.3

7、2M葡萄糖+1ml稀释的鸡血810ml0.32M甘油+1ml稀释的鸡血910ml0.32M乙醇+1ml稀释的鸡血1010ml0.32M丙酮+1ml稀释的鸡血附3:溶血结果的判断(1)不溶血:液体分2层,上层浅黄色透明,下层红色不透明,镜检红细胞完好。(2)不完全溶血:溶液混浊,上层变红色,镜检有部分红细胞破裂。(3)完全溶血:液体变红而且透明,镜检发现细胞全成碎片。附4:细胞膜内外物质交换示意图你知道吗?原始生命向细胞进化所获得的重要形态特征之一,是生命物质外面出现了一层膜性结构,即细胞膜。细胞膜和细胞内膜系统总称为生物膜(biomembrane)。细胞膜(

8、cellmembrane),又称原生质膜,是细胞结构

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